Question

回答有关生物工程的问题。（8分）

小鼠是实验室常用的实验动物，如：利用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体、利用小鼠进行DNA重组研究中导致了“基因敲除”技术的出现。

用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体。

（1）．将小鼠等分为两组，甲组定期间隔注射适量的含X病毒的溶液，其目的是____________________；乙组注射________________（作对照）。

（2）．为了保存有价值的杂交瘤细胞系，通常用超低温将其冻存，请分析其原因____________

___________________。

    用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术，能“敲除”DNA分子上的特定基因。该技术的主要过程如下：

第一步：分离小鼠胚胎干细胞，这些细胞中含有需要改造的基因，称“靶基因”。

第二步：获取与“靶基因”同源的DNA片断，利用特定技术在该DNA片段上插入neo^R基因（新霉素抗性基因）成为突变DNA（如下图），使该片段上的靶基因失活。

第三步：将插入neo^R基因（新霉素抗性基因）的靶基因转移入胚胎干细胞，再通过同源互换，用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个，完成对胚胎干细胞的基因改造。

第四步：将第三步处理后的胚胎干细胞，转移到特定培养基中筛选培养。

其基本原理如下图所示：

（3）．第二步中neo^R基因插入靶基因使用的工具酶是                      。neo^R基因不仅能使靶基因失活，还可作为        ；“靶基因失活”的根本原因是             。

（4）．从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞，到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠，运用到的生物技术有            、              等。

Answer

（8分，每空1分）（1）．获得能产生抗X病毒抗体的B淋巴细胞（浆细胞）    等量不含X病毒的溶液(2)．超低温抑制酶活性，利于保存其特性(3)．限制酶（限制性核酸内切酶）、DNA连接酶    标记基因    靶基因中的脱氧核苷酸数量序列发生改变，不能正常表达

(4)．克隆技术  转基因技术（合理给分）

【解析】制备单克隆抗体，需对杂交瘤细胞进行筛选，注入抗原，看是否发生凝集反应，通常实验要做对照实验实验组注入一定量的抗原，对照组注入等量不含抗原的溶液，低温保存是利用酶在低温条件下活性被抑制而不变性利于保存其特性。把目的基因插入运载体中通常用限制酶和DNA连接酶，通常一些特殊抗性的基因作为标记基因导入受体细胞内没有表达掘所需的产品原因通常是靶基因发生基因突变即其中的脱氧核苷酸数量序列发生改变，不能正常表达，基因敲除的胚胎干细胞利用的技术有转基因技术，动物细胞培养技术，克隆技术，动物胚胎移植技术等。