Question

（10分）尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类、数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示。

请分析回答问题：

KH2PO4	1.4 g
Na2HPO4	2.1 g
MgSO4·7H2O	0.2 g
葡萄糖	10.0 g
尿素	1.0 g
琼脂	15.0 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL

（1）培养基中加入尿素的目的是筛选________，这种培养基属于________培养基。 

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________，实验需要振荡培养，原因是__________________。

（3）转为固体培养时，常采用________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

（4）下列材料或用具中：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管；③实验操作者的双手。需要灭菌的是________；需要消毒的是________。（填序号）

（5）在进行分离分解尿素的细菌的实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有________（填序号）。

①由于土样不同 　②由于培养基污染  ③由于操作失误　④没有设置对照

（6）简述土壤中可分解尿素细菌的鉴定方法及原理： _____________。

Answer

 (1) 目的菌 选择    (2) 尿素 葡萄糖   为目的菌提供氧气

(3) 涂布平板(划线)    (4) ①和② ③ (5) ①②③

(6)在以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，使培养基的碱性增强，pH增高，使酚红指示剂变红

【解析】（1）培养基中加入尿素的目的是筛选分解尿素的细菌，该培养基属于选择培养基。

（2）氮源是尿素，碳源是葡萄糖，实验振荡的目的是为目的菌提供氧气。

（3）固体培养基上接种的方法常用涂布平板划线法。

（4）微生物培养过程中需要灭菌的有培养基、培养皿、玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管，需要消毒的有实验操作者的双手。

（5）A同学筛选出的菌落数与其他同学不同，数量较多，可能是土样不同、培养基污染、操作失误等。

（6）鉴定分解尿素的细菌的方法及原理是在以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，使培养基的碱性增强，pH增高，使酚红指示剂变红。