Question

(附加题10分) 基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G^↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点是—^↓GATC—; Gene I是抗氨苄青霉素基因，Gene II是抗四环素基因。根据图示回答下列问题：

（1）用限制酶II切割DNA后得到的是两个          末端。限制酶I剪切得到的一个末端可以画为                            。

（2）本实验中若要得到符合要求的重组质粒，应该用       切割质粒，用       切割目的基因。然后用              处理混合物得到重组质粒。

（3）把重组质粒导入动物细胞的方法一般是              。要把成功导入目的基因的受体细胞筛选出来，应该将细胞放在含有              的培养基中选择培养。

（4）不同生物的基因可以拼接的原因是                            。

Answer

（1）黏性末端  

（2）限制酶I            限制酶II    DNA连接酶

（3）显微注射法                     氨苄青霉素

（4）它们的DNA都是由4种脱氧核糖核苷酸构成的双螺旋结构（有相似的DNA结构）

【解析】（1）根据限制酶II的识别序列，切割DNA后能够得到2个黏性末端。

（2）限制酶II能够识别限制酶I的识别序列，所以切割质粒选择限制酶I，切割目的基因选择限制酶II。构建重组质粒需要DNA连接酶处理。

（3）将重组质粒导入动物细胞的方法一般是显微注射法，质粒中标记基因是氨苄青霉素基因，可用含氨苄青霉素的培养基来选择导入目的基因的受体细胞。

（4）由于不同生物的DNA都是由4种脱氧核糖核苷酸构成的双螺旋结构，所以不同生物的基因可以拼接。