Question

下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的过程，图中tet^R表示四环素抗性基因，amp^R表示氨苄青霉索抗性基因，BamHI、Bau3A I、Bst I、Haclll、Not I所指位点为限制酶的酶切位点，五种酶的识别序列及切割位点在下表中。据图表回答：

（1）将双链DNA在中性盐溶液中加热，两条单链分开，叫做DNA变性。变性后的DNA如果慢慢冷却，又能恢复为双链DNA，叫做退火。大量的如右图中N元素标记的DNA在变性后的退火过程中会形成                   种DNA。

（2）若对图中质粒进行改造，插入的Not I酶切位点越多，质粒的热稳定性越           。

（3）要将人乳蛋白基因插入载体，如果只允许用一种限制酶酶切载体和人乳铁蛋白基因，应选择的限制酶是                   。

（4）筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含               的培养基上进行。

（5）若从细胞中提取DNA和RNA，通过基因工程的方法，转移到另一种细胞时，转入DNA比转入RNA要有优势，理由是                      

（6）供体牛的受精卵的性染色体组成为            。在胚胎移植过程中，供、受体牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是             ，以保证移植的胚胎能够继续正常发育

（7）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用                     技术。

Answer

（1）1种   （2）高        （3）Bau3A I      （4）氨苄青霉素

（5）转入DNA不仅能合成相应的蛋白质，而且能够复制并传递给下一代——4分

（6）XX   使供体和受体生理环境相同    （7）抗原---抗体分子杂交

【解析】（1）该DNA变性后形成两条链：14N和15N。

（2）Not I识别的序列中G－C含量高，G－C之间氢键多，所以Not I酶切位点越多，热稳定性越高。

（3）Bau3A I能够识别BamHI的识别序列，所以能同种切割载体和人乳铁蛋白基因的酶是Bau3A I。

（4）重组质粒中含有ampR标记基因，可利用含氨苄青霉素的培养基进行筛选。

（5）由于转入DNA不仅能合成相应的蛋白质，而且能够复制并传递给下一代，所以转入DNA比转入RNA要有优势。

（6）乳腺生物反应器应选择母牛，其染色体组成是XX，为了使供体和受体生理环境相同，所以胚胎移植过程中应用促性腺激素对供受体母牛进行同期发情处理。

（7）检测人乳铁蛋白是否成功表达可选择抗原---抗体分子杂交技术。