Question

（8分） 菊花的组织培养的大致过程如下图所示，请回答下列问题：

(1)外植体的消毒：选取生长旺盛的嫩枝，冲洗干净。用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入               中摇动2-3次，持续6-7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗。吸干表面水分，放入质量分数为0.1﹪的          中1-2min。取出后，在无菌水中至少清洗3次，其目的是                。

（2）菊花组织培养过程中，启动             、脱分化、再分化的关键激素是               。通过B过程产生的愈伤组织细胞与枝条韧皮部细胞形态结构不同，其根本原因是            。

（3）该实验操作成功的关键是              ，所以要对外植体、超净工作台等消毒，

对                  等灭菌。

Answer

（8分）（1）体积分数为70﹪的酒精（或酒精）     氯化汞    漂净消毒液

（2）细胞分裂     细胞分裂素和生长素      基因选择性表达

（3）无菌操作（或无菌技术）    培养基、培养器具（或其中之一）

【解析】植物组织培养的基本原理是细胞的全能性。离体的植物器官或组织片段先脱分化形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。愈伤组织继续进行培养，再分化成根或芽等器官，最终发育成完整的植物体。对外植体用体积分数为70﹪的酒精（或酒精）进行消毒处理，选取生长旺盛嫩枝进行组培的原因是嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化，用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70%酒精中摇动2—3次，持续6—7秒，立即取出外植体，用无菌水清洗。用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中1—2分钟，取出后，在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液。

先使用生长素，后使用细胞分裂素

有利于细胞分裂，但细胞不分化

先使用细胞分裂素，后使用生长素

细胞既分裂也分化

同时使用

分化频率提高

诱导再分化时，生长素用量/细胞分裂素用量：比值高时有利于根的分化，抑制芽的分化；比值低时，有利于芽的分化，抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长。