Question

（20分）利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术。2005年青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目通过鉴定，该项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品，造福人类健康。下图为利用生物技术获得生物这一新品种和抗虫棉的过程，据图回答：

（1）在基因工程中，A表示             ，B表示                    。

（2）基因表达载体的构建是基因工程的核心，在构建过程中需要的工具有             

                                 ，一个完整的基因表达载体至少包括哪些部分       

                                                    。

（3）在②过程中一般采用                 技术将目的基因导入受体细胞，一般选用山羊的           作为受体细胞，通常采用                      技术检测外源基因是否插入了山羊的基因组，在研制乳腺生物反应器时，应使外源基因在小鼠的             细胞中特异表达。

（4）将目的基因导入棉花细胞中一般是采用               方法，要确定目的基因导入成功后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程

                                                                         。

Answer

（1）目的基因   重组DNA（重组质粒）

（2）   限制酶、DNA连接酶、质粒     启动子、终止子、标记基因、复制原点

（3）显微注射  受精卵  DNA分子杂交   乳腺

（4）农杆菌转化  让害虫取食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定其是否具有抗虫性状

【解析】主要考查基因工程的工具、步骤和应用。基因工程的工具有限制酶、DNA连接酶、运载体等，其中限制酶具有专一性：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。基因工程包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。目的基因的获取一般有3种途径：从基因文库中获取目的基因；利用PCR技术扩增目的基因；通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。一个完整的基因表达载体至少包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分。基因基因的检测与鉴定有四种方法：采用DNA分子杂交技术检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因，检测目的基因是否转录出了mRNA，检测目的基因是否翻译成蛋白质，进行个体生物学水平的鉴定（进行抗虫或抗病的接种实验）。