Question

（7分）回答下列有关动物细胞培养的问题：

（1）取胚胎或幼龄动物的器官或组织剪碎，分散成单个细胞，制成              ，放入培养瓶内，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的　　　　 　　　，这种培养称为                ，要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是　　　    　　　　。

（2）随着细胞分裂次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现　　        　　现象；现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是　　　        　                      　　　　　。

（3）动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有                       。

Answer

（7分）

（1）细胞悬液 接触抑制 原代培养 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）

（2）衰老甚至死亡   由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）      （3） 动物血清（促生长因子）

【解析】动物细胞存在贴壁生长，接触抑制，通常是将细胞制成细胞悬液，动物细胞培养的叫原代培养，将细胞分散开来或从瓶壁上分离下来通常用的酶是胰蛋白酶或胶原蛋白酶，随着细胞传代培养代数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象，但极少数细胞可以连续增殖，有些细胞会因遗传物质改变而变成不死性细胞。由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能能够进入死细胞内而着色。由于中期染色体形态固定、数目清晰，因此最好选用细胞分裂到中期的细胞用显微镜观察染色体数目。动物细胞培养中加入特殊的物质为动物血清。