（5分）叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可以用下面的图解简单表示，根据图解完成问题：
叶片
↓洗净、灭菌、切条、酶解
原生质体悬浮液
↓过滤、离心
纯净的原生质体
↓DPD培养基中培养
愈伤组织
（1）图解中“酶解”所用的酶应该包括 。
（2）原生质体的结构由 三部分组成。
（3）DPD培养基的成分中，除了各种营养成分外，还必须含有 才能诱导获得愈伤组织。
（4）获得原生质体后，需要对其活力进行检查，下列哪种实验最适合?_________。
A.观察原生质体的结构是否完整 B.观察细胞质流动
C.观察细胞的有丝分裂 D.观察叶绿体数目的多少
（5）一般在培养基上培养24～48小时后，大部分原生质体已再生出细胞壁。可以通过取样，利用25%蔗糖溶液以及其他用具，通过 实验来鉴别细胞壁是否已经再生。
（7分）回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）取胚胎或幼龄动物的器官或组织剪碎，分散成单个细胞，制成 ，放入培养瓶内，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 ，这种培养称为 ，要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是 。
（2）随着细胞分裂次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现 现象；现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是 。
（3）动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有 。
（20分）利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术。2005年青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目通过鉴定，该项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品，造福人类健康。下图为利用生物技术获得生物这一新品种和抗虫棉的过程，据图回答：
（1）在基因工程中，A表示 ，B表示 。
（2）基因表达载体的构建是基因工程的核心，在构建过程中需要的工具有
，一个完整的基因表达载体至少包括哪些部分
。
（3）在②过程中一般采用 技术将目的基因导入受体细胞，一般选用山羊的 作为受体细胞，通常采用 技术检测外源基因是否插入了山羊的基因组，在研制乳腺生物反应器时，应使外源基因在小鼠的 细胞中特异表达。
（4）将目的基因导入棉花细胞中一般是采用 方法，要确定目的基因导入成功后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程
。
1970年，特明和巴尔德摩证实了RNA病毒能依赖RNA合成DNA的过程，并发现了催化此过程的酶。下面为形成cDNA的过程和PCR扩增过程示意图。请根据图解分析，下列说法不正确的是( )
A．催化①过程的酶是逆转录酶
B．从图示可以看出要将碱基对之间的氢键断开可以用核酸酶H和高温处理
C．从图中信息分析可知，②⑤过程为DNA复制，催化⑤过程的酶能耐高温
D．如果RNA单链中有碱基100个，其中A占25%，U占15%，则通过该过程合成的一个双链DNA片段中有胞嘧啶30个
单克隆抗体制备过程中所用的骨髓瘤细胞是一种基因缺陷型细胞，其合成核酸的途径能被氨基喋呤阻断。现将从预先注射了某种抗原的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞与上述骨髓瘤细胞混合，加入PEG促融后，再加入含氨基喋呤的培养液。若将这些混合物分装于细胞培养板的小孔中培养（如右图所示），则小孔中的培养物不可能出现的结果是
A．没有活细胞，产生抗体
B．没有活细胞，不产生抗体
C．细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阴性
D．细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阳性
钱永健先生因在研究绿色荧光蛋白方面的杰出成就而获2008年诺贝尔奖。在某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。由此可知
A．该生物的基因型是杂合的
B．该生物与水母有很近的亲缘关系
C．绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达
D．改变绿色荧光蛋白基因的1个核苷酸对，就不能检测到绿色荧光
