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(14分)绿色荧光蛋白基因(GFP)被发现以来,一直作为一个监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。

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(1)若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA,N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA,则在构建含该GFP的重组质粒A时,应选用的限制酶是                 。③过程需要的酶是            

(2)检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上,可采用               技术进行检测。

(3)用显微镜可观察到用于⑥过程的猪卵母细胞的卵黄膜和透明带之间有         个极体。用于⑤过程的猪胎儿成纤维细胞,一般选用传代10代以内的细胞,原因是                                    

(4)由⑦过程获得的重组细胞培育成绿色荧光转基因克隆猪,涉及到的现代生物技术手段有                                              

(5)为了加快繁殖速度,可采用胚胎分割的方法。得到绿色荧光转基因克隆猪(雌性)之后,可用                       处理,使之超数排卵,提高其繁育能力。

 

(14分,每空2分)(1)HindⅢ和PstⅠ    DNA连接酶      (2)DNA分子杂交  (3)1   10代以内的细胞保持正常的二倍体核型    (4)早期胚胎培养和胚胎移植(缺一不得分)   (5)促性腺激素 【解析】从图示可知,运载体是用HindⅢ和PstⅠ切割,所以目的基因也必须使用相同的限制酶切割,具有相同的粘性末端,用DNA连接酶把目的基因和运载体相连,目的基因是否导入通常利用DNA杂交技术来获得,没有完成受精作用的次级卵母细胞有一个极体,一般用于核移植的细胞的细胞核通常选用传代10代以内的细胞,是因为10代以内的细胞保持正常的二倍体核型,动物基因工程通常是导入受精卵中的在体外涉及动物细胞的培养成早期胚胎,再通过胚胎移植到母体内发育,利用促性腺激素对受体和供体通常采用同期发情处理,使之超数排卵,提高其繁育能力便于移植成功。
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考点分析:
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(10分)请回答下列有关细胞工程和胚胎工程的问题:

一对健康夫妇生下一男婴,一岁时脑出血死亡,两年后女方怀孕6个月时,经羊水及脐带血诊断为男孩且患血友病,遂引产。于是夫妇俩到广州中山大学附属一院做试管婴儿。医生培养了7个活体胚胎,抽取每个胚胎1~2个细胞检查后,选两个胚胎移植,最后一个移植成功,生出了一健康婴儿,她是我国第三代试管婴儿。

请回答:

(1)试管婴儿技术属于有性生殖还是无性生殖?__________,和母亲正常怀孕生产的过程相比,其不同点在于__________________________________。

(2) 医生抽取活体胚胎的1~2个细胞后,可通过显微镜观察___________判断早期胚胎的性别,你认为医生应选用________性胚胎进行移植,应用现代生物技术,现在人们已能够选取最理想的胚胎,自然状态下,出现这样的胚胎的概率是________。该实例体现了现代科学技术应用于社会和人类生活的重要意义。

 

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(6分)下图表示制备单克隆抗体过程

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(1)在获得B淋巴细胞之前,小鼠已被多次注射          (相同/不同)抗原,注射后小鼠体内发生相应的        (细胞/体液)免疫反应,生成能产生抗体的B淋巴细胞。

(2)①过程中,融合结果随机出现多种不同的杂交细胞,

②过程在特定的                        上进行筛选,从而得到           细胞。③培养的气体

环境为                  

(3)由于单克隆抗体与传统方法获得抗体相比,具有                        的特点,广泛用于疾病的诊断等方面。

 

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(10分)以下为植物体细胞杂交技术流程图.其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞,基因型分别为Aa和Bb。据图分析回答:

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(1)①过程所使用的物质是______________,由此生成的a和b细胞称为___________,将若干a和b等量混合后转移到培养基上培养,再经过②和③,c细胞的基因型可能有________种(只考虑两两融合),经筛选出的杂种细胞的基因型是               

(2)采用化学法进行过程②时,一般是用____________作为诱导剂。植物体细胞杂交与自然状况下有性生殖细胞的结合相比,前者的主要优势是_________________________。

(3)④过程中,细胞的全能性会________(增大或减小),⑤过程中,与芽、根的分化相关的主要植物激素是_____________________________。

(4)如果图中甲、乙分别为番茄和马铃薯的体细胞,从理论上讲用融合后的细胞培育出的“番茄—马铃薯”植株是_____________(可育/不可育)。

(5)获得杂种植株后,若要利用基因工程技术导入抗除草剂基因,在基因导入时,最好把该基因导入到植物的叶绿体或线粒体基因组中,这样做的好处是_____________________。

 

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(10分)下图示部分细胞结构和多种蛋白质,请分析回答以下问题:

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(1)该图不能表示原核细胞的理由是________________________________________,其在结构上与原核细胞的统一性表现在__________________________________________。

(2)A蛋白使细胞间的黏着性增强,所以在动物细胞工程中常用___­­­___­­­____­­­____­­­______处理组织碎块,使细胞分散开。为了防止培养过程中杂菌的污染,可向培养液中加入适量的____­­­____­­­____­­­____­­­____­­­。

(3)B蛋白参与的跨膜运输方式可能是_________________,甲状腺细胞积累碘时所需的直接能源物质产生的场所是______________________,请写出该物质供能时的反应式_______________________________。

(4)C蛋白与多糖结合形成的物质在细胞癌变后,其含量的变化是_____________  __。

(5)D蛋白具有催化功能,它与无机催化剂相比,催化效率更高的原因是____­­­____________。

(6)ABCD四种蛋白质结构不同的直接原因是______________________________________。

 

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有一种“十五肽”的化学式为CxHyNzOdSe(z>15,d>16)。已知其彻底水解后得到下列几种氨基酸:

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下列有关说法中不正确的是

A.水解可得e个半胱氨酸

B.水解可得(d-16)/2个天门冬氨酸

C.水解可得z-15个赖氨酸

D.水解时消耗15个水分子

 

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