Question

下图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：

（1）图中cDNA文库            基因组文库（填“大于”、“等于”或者“小于”）。

（2）目的基因获取之后，需要进行            ，其组成，必须有           以及标记基因等。此步骤是基因工程的核心。

（3）将该目的基因导入某双子叶植物细胞，其能否在此植物体内稳定遗传的关键是

         可以用         技术进行检测。

（4）如果要想使该酶活性更强或具有更强的耐受性，需要对现有蛋白质进行改造，这要通过基因工程延伸——蛋白质工程。首先要设计预期的            ，再推测应有的氨基酸序列，找到相对应的            。

Answer

（7分）（1）小于    （2）基因表达载体的构建    启动子、目的基因、终止子

    （3）目的基因是否整合到植物细胞的染色体上        DNA分子杂交

    （4）蛋白质结构    脱氧核苷酸序列

【解析】本题考查基因操作的基本过程弄清cDNA文库和基因组文库的差别、基因表达载体的构成、目的基因获取途径和导入受体细胞的方法是正确解答该题的前提。基因组文库是指将某生物的全部基因组DNA切割成一定长度的DNA片段克隆到某种载体上形成的信使，而cDNA文库是由mRNA经逆转录形成的基因组成的，由于基因的选择性表达，所以来自cDNA文库小于基因组文库，从供体细胞中的DNA中获取目的基因，首先应用限制酶将目的基因从其所丰的DNA分子上切割下来，B过程是以信使RNA为来DNA的逆转录过程，PCR技术是一种体外扩增DNA的方法，其原理为DNA复制，能将得到的目的基因在细胞外大量扩增，基因表达载体包括目的基因、标记基因、启动子、终止子，其构建是基因工程的核心，将目的基因导入某双子叶植物细胞常采用的方法是农杆菌转化法，目的基因只有融合到植物细胞的染色体上才能在植物体内稳定遗传，可通过DNA分子杂交的方法对目的基因是否融合到染色体上进行检测。