T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为T1代）。
环状DNA示意图
A、B、C、D表示能与相应T—DNA链
互补、长度相等的单链DNA片段；
箭头指示DNA合成方向。
（1）为筛选出已转化的个体，需将T1代播种在含 的培养基上生长，成熟后目交，收获种子（称为T2代）。
（2）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T2代播种在含 的培养基上，获得所需个体。
（3）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与 植株进行杂交，再自交 代后统计性状分离比。
（4）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性 。
（5）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。
其过程是：提取 植株的DNA，用限制酶处理后，再用 将获得的DNA片段连接成环（如下图）。以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取 作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。
东方网2008年9月21日消息，中山大学中山眼科中心主任任葛坚领导的研究小组将猴子的皮肤干细胞注射到小鼠的囊胚里，再将囊胚移入到代孕鼠体内发育而形成猴鼠嵌合体——猴鼠，用于角膜等器官的移植研究。请回答：（9分）
（1）胚胎干细胞体外培养诱导分化可形成大量皮肤干细胞，原因是其具有 。
根据胚胎干细胞的这种功能特性，当我们身体的某一类细胞功能出现异常或退化时，利用胚胎干细胞的治疗思路是 。
（2）胚胎干细胞在形态上表现为体积小、 等特点，一般从 中分离获取胚胎干细胞。
（3）囊胚时，胚胎细胞开始出现分化，有些细胞个体较小，将来只能发育成胎膜和胎盘，这类细胞称为 。因此，应将猴的皮肤干细胞注射到小鼠囊胚的 部位，以伴随其发育成某种组织。
（4）将囊胚移入代孕鼠体内属于 技术，此技术对代孕受体的要求是 。在畜牧生产中采用这种技术的优势主要是 。
应用生物工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：
（1）①过程用到的“分子缝合针”，其对所“缝合”的DNA末端的碱基序列 （填“有”或“无”’）特异性的识别作用。③过程采用的技术除胚胎移植外还包括 。
（2）③过程培养到囊胚时，可以对其胚胎进行 分割，以期培育出多头相同的转基因牛犊。在胚胎移植前，可对囊胚的 细胞进行分行，以确定其性别。
（3）有人发现prG能激发细胞不断分裂，可以通过基因工程将该调控基因导入特定的受体细胞来制备单克隆抗体，受体细胞II最可能是 细胞，Ⅲ代表的细胞具有 的特点。
（4）在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是 。
下图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：
（1）图中cDNA文库 基因组文库（填“大于”、“等于”或者“小于”）。
（2）目的基因获取之后，需要进行 ，其组成，必须有 以及标记基因等。此步骤是基因工程的核心。
（3）将该目的基因导入某双子叶植物细胞，其能否在此植物体内稳定遗传的关键是
可以用 技术进行检测。
（4）如果要想使该酶活性更强或具有更强的耐受性，需要对现有蛋白质进行改造，这要通过基因工程延伸——蛋白质工程。首先要设计预期的 ，再推测应有的氨基酸序列，找到相对应的 。
科学工作者将抗虫毒蛋白基因通过载体转入棉花细胞，获得了很好的抵抗棉铃虫的作用。在研制抗虫棉的过程中，利用标记基因，可以快速检查基因表达载体是否导入棉花细胞，然而，即使基因表达载体已经导入棉花细胞，也不能确定转基因过程已经取得成功。因此，在该项工程的最后阶段，需要做如下一系列检测：
（1）用放射性同位素标记的 作探针，可以分别检测棉花细胞中是否有 。
（2）向棉花细胞的匀浆中加入特定的 ，可以检测棉花细胞中是否能够产生抗虫毒蛋白。
（3）除了上述分子水平的检测外，还需要做个体水平检测。其方法是： 。
（4）我国西北的一些地区年降雨量很小，只适宜种植少数的草本植物，但却被硬性规定种植转基因的抗虫棉，结果造成减产。这个案例主要违背了生态工程的 原理。
（5）一般来说，生态工程的主要任务是对 进行修复，对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力。
利用基因工程生产蛋白质药物，经历了三个发展阶段。第一阶段，将人的基因转入细菌细胞。第二阶段，将人的基因转入小鼠等动物细胞。前两个阶段都是进行细胞培养，提取药物。第三阶段，从转基因动物的乳汁或尿液中提取药物。
（1）将目的基因导入细菌细胞之前，应对细菌进行处理，采用的方法是用 处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为 细胞。
（2）进行动物细胞培养时，必须加入 以维持培养液pH
（3）利用转基因牛羊尿液生产提取药物的过程是将目的基因导入牛羊的 细胞，然后动物胚胎培养到 时期进行胚胎移植，最后获得动物体。
（4）在乳汁中生产具有重要价值产品的转基因动物称为 。
