Question

美籍华裔科学家钱永键和日本海洋生生学家下村修等人因在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面的突出贡献，获得了2008年诺贝尔化学奖。下图是我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

(1)图中通过①、②过程形成重组质粒，需要用同一种限制酶切割目的基因和质粒。限制酶的特点是                                                。

(2)③过程将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是                   。

(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是                            。

(4)以上培育过程中应用到的生物技术主要有         、         、         等。(写三项即可)

(5)④过程形成重组细胞时应用      期的卵母细胞，去掉其细胞核的原因是                   。

Answer

（1）能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割DNA分子（2分）；

（2）显微注射法；

（3）为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因；

（4）转基因技术，核移植技术，动物细胞培养技术，胚胎移植技术（答三个，每个一分）

（5）减数第二次分裂中期     使克隆出的动物遗传物质几乎全部来自于供体细胞（避免卵细胞核中得遗传物质对后代造成干扰）（2分）

【解析】（1）限制酶的特点是能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割DNA分子。

（2）将目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法。

（3）标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因。

（4）上述培育过程应用的技术手段有转基因技术，核移植技术，动物细胞培养技术，胚胎移植技术等。

（5）去核卵母细胞需培养至减数第二次分裂中期，为了使克隆出的动物遗传物质几乎全部来自于供体细胞，所以卵细胞需去掉细胞核。