Question

绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和鲴织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。

（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA—，N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA—，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用的限制酶是__________。③过程需要的酶是__________。

（2）④过程将基因表达载体导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是__________。

（3）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可采用__________技术进行检测。

（4）用显微镜可观察到用于⑥过程的猪卵母细胞的卵黄膜和透明带之间有__________个极体。用于⑤过程的猪胎儿成纤维细胞，一般选用传代10代以内的细胞，原因是__________。

（5）由⑦过程获得的重组细胞培育成绿色荧光转基因克隆猪，涉及到的现代生物技术手段有__________。

（6）为了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。若对⑧过程得到的囊胚阶段胚胎进行分割，要注意__________。得到绿色荧光转基因克隆猪（雌性）之后，可用__________处理，使之超数排卵，提高其繁育能力。

Answer

【解析】本题综合考查了基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，属于对识记、理解层次的考查。能与—TCGA—互补配对的是—AGCT--，能与—TCGA--互补配对的是—ACGT--，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用的限制酶是HindⅢ和PartⅠ。目的基因导入动物细胞常用的方法为显微注射法。检测目的基因是否进入受体细胞的方法为DNA分子杂交。传代10代以内的细胞遗传物质不会变化。