Question

加热会使蛋白质变性，在变性过程中肽键是否因此而断裂呢？请设计一个验证“蛋白质在加热变性后肽键没有断裂”的实验。

材料、用具：0.01 g·mL－1的CuSO4的溶液（双缩脲试剂B液）、0.1 g·mL－1的NaOH溶液（双缩脲试剂A液）、蛋清液、清水、酒精灯、试管、滴管等必备用品。

(1)实验原理：蛋白质中的肽键与双缩脲试剂发生颜色反应，呈紫色。如果加热变性的蛋白质与双缩脲试剂反应仍呈紫色，即可证明肽键没有断裂。

(2)方法步骤：

1取两支试管，分别编号A、B，向两支试管中加入__________________。

2_____________________________________________________。

3_____________________________________________________。

4观察两试管中的颜色变化。

（1）   预期结果：___________________________________。

（2）     实验结论：蛋白质在加热变性后肽键没有断裂。

Answer

（共8分，每空2分）

（2）1等量的蛋清液

      2对A试管进行加热，使蛋清变性；B试管不加热

   3分别向两支试管中滴加1ml0.1 g·mL－1的NaOH溶液，摇匀；再向两支试管分别滴入4滴0.01 g·mL－1的CuSO4的溶液，摇匀

（3）A、B试管中均出现紫色反应

【解析】原理：蛋白质能与双缩脲试剂发生紫色反应，是因为蛋白质中含有肽键。将加热变性的蛋白质与双缩脲试剂混合，如果也能发生紫色反应，则证明蛋白质在加热变性后肽键没有断裂 步骤：(1)取2支试管，编号1、2；(2)向两支试管中分别加入2 mL稀释的蛋清液，并将1号试管中的蛋清液加热煮沸3～5 min；(3)分别加入1 mL 0.1 g/mL的NaOH溶液，振荡试管；(4)然后分别向两支试管中缓慢滴入4滴0.01 g/mL的CuSO4溶液，振荡试管，观察实验现象 结果：1号、2号试管中均出现紫色反应 结论：蛋白质在加热变性后肽键没有断；反应需在碱性条件下，化学书上有这个反应，若先加入硫酸铜[CuSO4]溶液，再加入氢氧化钠[NaOH]溶液，则无法充分制造碱性环境，此时CuSO4会与NaOH发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜[Cu(OH)2]沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的

用两方面，一般是加入一滴NAOH，四滴CUSO4，后者不能太多，否者多于的CUSO4会与前者反应生成蓝色物质，干扰紫色的观察