Question

（14分）人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。

大致步骤如下：

a．将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛胚胎细胞，形成重组细胞①；

b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②；

c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；

d．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。

请回答下列问题：

（1）步骤a中，获取的目的基因，在体外可通过      大量扩增，在导入雌性奶牛胚胎细胞前，需构建重组DNA，该过程需要的工具酶是                         。

（2）步骤b利用的技术是             ，胚胎工程操作中最后环节是           。

（3）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），培养如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，必须用          处理内细胞团，使之分散成单个细胞，用于饲养层的细胞一般是         ，为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的             。

Answer

（1）PCR        限制酶（限制性核酸内切酶）、DNA连接酶

（2）核移植     胚胎移植

（3）胰蛋白酶    胚胎成纤维细胞     抗生素 

【解析】

试题分析：由题意可知，本题为一到涉及基因工程a、细胞核移植b、胚胎移植cd等众多现代生物技术的题型。但最终是为了成功地得到能产生人的血清蛋白的转基因牛。

（1）基因工程中，为了获得大量的目的基因，可通过PCR技术对目的基因进行扩增；构建基因表达载体常用两种工具酶，一是基因的剪刀——限制性核酸内切酶，二是基因的针线——DNA连接酶。

（2）根据b步骤的核心操作，将细胞核移植到去核牛卵细胞中，可知该技术属于细胞核移植；胚胎工程最后要把胚胎移植到母体子宫中获得完整的个体。

（3）细胞培养的过程中容易出现接触抑制的现象，所以要用胰蛋白酶把内细胞团分离开，以来防止接触抑制，二来增大细胞与培养液的接触面积；胚胎成纤维细胞一般用作为饲养层细胞；在动物细胞培养的过程中，可加入适量的抗生素来移植其他细菌对培养液的污染。

考点：本题考查基因工程、细胞核移植和胚胎移植技术。