Question

因为猪的基因和人类的基因存在一定相似度。据报道经过特殊处理的猪皮可在人身上存活3周左右，起到保护创面免受感染的作用。移植猪皮后，还要在猪皮上开很多小口，移植患者的自体皮放入其中，自体皮慢慢生长，覆盖裸露的皮肤。而猪皮最终会掉光。为了使移植的猪皮存活更长时间，有人设法导入人的相关基因（用P表示），获得转基因小白猪。其简单流程如下图所示：

（1）过程?中形成重组DNA常用的酶有_________和___________；将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是______________。

（2）过程?中，常用____________酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养成纤维细胞时需要满足的条件是无菌、无毒的环境、_____________、温度和pH、______________。

（3）过程?中所用的胚胎工程技术是_____________________，然后将早期胚胎移入另一头与供体_______________，但未经配种的代孕母猪的相应部位。

（4）图中的卵母细胞应在体外培养到__________________期。

Answer

（9分，每空1分）

（1）限制性核酸内切酶   DNA连接酶 显微注射法

（2）胰蛋白（或胶原蛋白） 营养   气体环境（或通气环境）

（3）（早期）胚胎体外培养   同期发情（或同时发情）

（4）减数第二次分裂中

【解析】

试题分析：本题考查基因工程和胚胎工程的相关知识。

（1）过程?中形成重组DNA常用的酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶；将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是显微注射法。

（2）过程?中，常用胰蛋白酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养成纤维细胞时需要满足的条件是无菌、无毒的环境、营养、温度和pH、气体环境。

①无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。

②营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。

③温度和PH。

④气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（CO2的作用是什么？维持培养液的PH。）

（3）过程?中所用的胚胎工程技术是（早期）胚胎体外培养，然后将早期胚胎移入另一头与供体同期发情（或同时发情），目的使得供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境。

（4）图中的卵母细胞应在体外培养到减数第二次分裂中期，原因：卵(母)细胞大，容易操作；卵(母)细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。

考点：基因工程的工具酶，将目的基因导入动物细胞的方法，动物细胞培养的条件。