Question

肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该技术基本流程如图１。

（１）进行过程①时，需用      酶切开载体以插入let-7基因。载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为       。

（２）进行过程②时，需用   酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。

（３）研究发现，let-7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图２。据图分析，可从细胞提取      进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是细胞中        （RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起的。

Answer

（1）限制性核酸内切酶（或限制）  启动子

（2）胰蛋白

（3）RNA   RAS蛋白

【解析】

试题分析：

（１）进行过程①时，需用同种限制性核酸内切酶切开载体以插入let-7基因，形成相同的粘性末端。载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为启动子。

（２）进行过程②时，细胞出现接触性抑制，需用胰蛋白酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。

（３）研究发现，let-7基因能影响RAS的表达，可从细胞提取RNA 进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是细胞中RAS蛋白含量减少引起的，因为RASmRNA与let-7mRNA配对，翻译受到抑制。

考点：基因工程、动物细胞培养、遗传信息的表达。