Question

天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：

（1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是____________，用____________将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子____________，以完成工程菌的构建。

（2）基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括哪几部分?

________________________。（4分）

（3）若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是____________ ，若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用____________检测。或将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一段时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈，请解释该现象发生的原因。________________________________________________

Answer

（1）限制酶（限制性核酸内切酶）   DNA连接酶 导入受体细胞（2）目的基因、启动子、终止子、标记基因等（3）DNA分子杂交技术  抗原-抗体杂交 该工程菌产生的淀粉酶可分泌到培养基中，水解淀粉后的区域，遇到碘液不变蓝，从而产生透明圈

【解析】

试题分析：

（1）在基因工程中，淀粉酶基因属于的目的基因，可用同种限制酶切割含有淀粉酶基因的外源DNA分子和运载体DNA，以产生相同的黏性末端，再用DNA连接酶将淀粉酶基因与载体拼接成重组DNA分子，下一步将该DNA分子导入受体细胞，以完成工程菌的构建。

（2）基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包含目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分。

（3）若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是DNA分子杂交技术，若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用抗原-抗体杂交检测。或将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，该工程菌可产生淀粉酶分泌到培养基中，水解淀粉后的区域，遇到碘液不变蓝，会产生透明圈，这样也可以鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌。

考点：本题考查基因工程的相关知识。