Question

已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：

（1）实验步骤①所代表的反应过程是_______________

（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用______________、________________

（3）如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能进行________，也不能进行______________。

（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特征，可用_______________与______________________进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。

(5)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是_______________________________。

Answer

（16分，每格2分）

答案 (1)逆转录 (2)限制性核酸内切酶和DNA连接酶 (3)复制 以其为模板合成S基因的mRNA(或转录)(4)大肠杆菌中表达的S蛋白 SARS康复病人血清 (5)相同 表达蛋白质所用的基因相同

【解析】

试题分析：本题考查基因工程的相关知识。

（1）实验步骤①RNA控制DNA合成，该过程是逆转录。

（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B，必须使用同种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体，形成相同的粘性末端，再用DNA连接酶，形成重组DNA。

（3）如果省略步骤②基因表达载体的构建，而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能进行复制，也不能进行以其为模板合成S基因的mRNA(或转录)。

（4）步骤④检测所表达的S蛋白的特征，可用大肠杆菌中表达的S蛋白与SARS康复病人血清进行抗原—抗体特异性反应实验，如果能够特异性的结合，说明表达成功。

(5)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列相同，根本原因是表达蛋白质所用的目的基因相同。

考点：基因工程的步骤。