Question

根据基因工程的有关知识，回答下列问题： 

（1）质粒运载体用EcoRI切割后产生的片段如下：

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRI切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是                                                 。 

（2）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即       DNA连接酶和T₄DNA连接酶。 

（3）反转录作用的模板是                ，产物是                   。若要在体外获得大量反转录产物，常采用               技术。 

（4）基因工程中除质粒外，                    和                  也可作为运载体。 

（5）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是                                                                       。 

Answer

（1）切割产生的DNA片段末端与EcoRI切割产生的相同

（2）E·coli   （3）mRNA 单链DNA    PCR（聚合酶链式反应）  

（4）动植物病毒    λ噬菌体的衍生物

（5）未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱

【解析】

试题分析：（1）为使运载体与目的基因相连，不同的限制酶应切割出相同的黏性末端，它们必须要能识别相同的核苷酸序列，并且使每条链中相同的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

（2）DNA连接酶，根据酶的来源不同，可以将这些酶分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为E·coli DNA连接酶；另一类是从T4噬菌体中分离出来的，称为T4DNA连接酶。

（3）反转录是以RNA为模版来合成DNA的过程。可以在体外短时间内大量扩增DNA的技术叫PCR（多聚酶链式反应）

（4）基因工程中运载体除质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。

（5）大肠杆菌细胞外有细胞壁和细胞膜，能阻止其他物质的进入，只能通过Ca2+处理细胞，使细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。

考点：基因工程