广西省水牛研究所科研人员利用克隆胚胎冷冻技术，使一头杂交母水牛顺利产下一头冷冻胚胎移植的体细胞克隆雌性水牛犊，取名“盼盼”。它的出生经历了一个严密复杂的科学操作过程（如图所示）：
⑴当克隆牛“盼盼”性成熟后进行减数分裂，其初级卵母细胞内可以形成 个四分体。
⑵①、④过程主要采取 技术才能获得细胞群或囊胚，此时在培养液中常加入一定量的二氧化碳，其目的是 。③过程中常用方法是 。
⑶根据项目专家介绍，水牛克隆胚胎冷冻技术的研究成功，有利于水牛克隆技术的推广应用，其重要意义在于 （答出一点即可）。
人血中提取的血清白蛋白在临床上需求量很大，由于人类免疫缺陷病毒(HIV)等病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。通过一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下：
a．采集良种供体奶牛的卵母细胞和精液，通过体外受精形成受精卵，进行体外培养形成胚胎，然后再选出雌性奶牛胚胎供进一步使用。
b．将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛胚胎细胞，形成细胞①；
c．取出细胞①的细胞核，注入去核奶牛卵细胞中，形成细胞②；
d．电脉冲刺激细胞②促使其形成早期胚胎；
e．将早期胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
(1)一般情况下，良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞数量很少，往往给雌牛注射
激素，使其超数排卵。不直接使用性激素的原因是 。
(2)采集的精子必须经过 作用，才能进行受精作用。
(3)细胞①和②中 (①、②)实现了基因重组。
(4)在实验过程a中要选择“雌性奶牛胚胎”的原因是 。
(5)运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞(ES细胞)，培养过程如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，必须用 处理内细胞团，使之分散成单个细胞。胚胎干细胞的结构特点是 。若想获取更多的基因型相同的小牛，应采取 技术。在培养动物细胞时，培养液中加抗生素的目的是 。
下图为单克隆抗体制备流程示意图。
(1)单克隆抗体制备技术的基础是 。
(2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是 。在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的 和 ，以保证生命活动的正常进行。
(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞／ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是 。
(4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先
后顺序是 、 、 、 。
对烟草愈伤组织器官分化的研究发现，在改变培养基中IAA（生长素）与KT（一种人工合成的细胞分裂素）的比例时，可改变愈伤组织的分化方向，如下图所示。请回答下列问题：
（1）细胞分化的实质是 。
（2）烟草组织块炽已经分化的细胞经过诱导后，失去其特有的 和 而转变成未分化细胞的过程叫做脱分化。
（3）培养基中添加的IAA与KT的比值较高时，有利于 的形成，抑制 的分化；IAA在组织培养中的作用是 和 。
（4）在植物组织培养过程中，容易得到突变体的原因是 。
科学家用大肠杆菌进行诱变实验，获得两个营养缺陷型菌株，菌株A不能合成甲硫氨酸和生物素，菌株B不能合成苏氨酸和亮氨酸，将这两种菌株混合在缺少这四种营养素的培养基上，出现了能够生长繁殖的大肠杆菌，由此推断这两种菌株间实现了基因交流。现代遗传学研究发现，细菌间的基因交流与F因子有关，F因子是一种质粒，含有F因子的大肠杆菌（F+）是基因的供体，不含F因子的大肠杆菌（F-）是基因受体， F+大肠杆菌表面有一种称为性菌毛的毛状突起，与F-大肠杆菌接触时形成接合管，基因交流过程如下图所示：
请回答下列问题：
（1）科学家获得两个营养缺陷型菌株的原理是 ，两个菌株混合，在缺少相应的四种营养素的培养基上出现能生长繁殖的新菌株，这种变异属于 。
（2）遗传学家将含有F因子的基因供体称为父本，不含有F因子的基因受体称为母本，细菌间的这种基因交流行为称为有性生殖，这种遗传现象是否遵循孟德尔的遗传定律？ ，理由是 。
（3）F因子在细胞中以游离或整合到拟核DNA中两种状态存在，F因子能够整合到拟核DNA中的原因是 。
（4）F因子的单链进入F-细菌，F-细菌变成F+细菌的原因是 。
（5）在基因工程中，作为目的基因载体的质粒DNA分子上有特殊的遗传标记基因，如抗氨苄青霉素基因，鉴定受体细胞是否含有重组DNA的实验思路是 。
2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：
（1）④过程应用的主要生物技术是 。
（2）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于 工程技术范畴。
（3）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图分析：
①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入 。
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的 和 （基因），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于 。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。
③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是 。
（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为
，则该酶识别的核苷酸序列是 。
