Question

图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。下列不正确的是（ ）

A. 图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖连接

B. 若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，其产物长度为537bp、790bp、661bp

C．若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后形成重组质粒，那么应选用的限制酶是MboI

D．在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加相应抗生素的培养基进行培养

Answer

C

【解析】

试题分析：

A项中，DNA单链中相邻两个碱基之间通过“脱氧核糖—磷酸—脱氧核糖”连接，正确；

B项中，Sma I识别的序列为CCCGGG，切割后会产生平末端；图1所示的DNA分子中含有两个Sma I的识别位点，第一个识别位点在左端534bp序列向右三个碱基对的位置；第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基对的位置，从这两个位点切割后产生的DNA片段长度分别为534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段长度分别为537bp、790bp和661bp，正确。

C项中，能够获取目的基因并切开质粒的限制酶有识别序列为GGATCC的BamH I和识别序列为GATC的Mbo I，若使用Mbo I会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，所以要用BamH I来切割目的基因和质粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于筛选出含有重组质粒的大肠杆菌。错误。

D项中，重组质粒含有抗生素抗性基因，因此成功导入目的基因的大肠杆菌可以抗抗生素，因此一般需要用添加相应抗生素的培养基进行筛选。正确。

考点：基因工程的操作程序