Question

H7N9型禽流感是全球首次发现的新亚型RNA流感病毒，目前最为快速有效的检测手段是RT-PCR核酸检测。RT-PCR的过程包括反转录作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板进行扩增，过程如下图所示。据此分析下列问题

（1）传统PCR技术的原理是_________，过程中低温退火的含义是____________________。

（2）在RT-PCR中每一步都有酶的参与，上图中过程1中的关键酶是___________；PCR中的关键酶是_____________，该酶的作用特点是_____________、_________________

________________________________。

（3）在对病毒核酸进行检测时，主要通过RT-PCR扩增其关键的基因序列，这时引物的设计就非常关键，根据下图分析，请你选择合适的引物____________。

Answer

（9分）（1）DNA复制  引物与模板链互补配对

（2）逆转录酶  Taq酶  耐高温  不能从头合成DNA，只能从3’端延伸DNA链

（3）引物Ⅰ和引物Ⅱ

【解析】

试题分析：获得目的基因的方法：①从基因文库中获取 ②利用PCR技术扩增 ③人工合成（化学合成）。根据题意和图示分析可知：（1）传统PCR技术的原理是DNA复制；过程中低温退火的含义是让引物与模板链互补配对。（2）过程1是遗传信息从RNA到DNA，是逆转录，所以过程中的关键酶是逆转录酶。PCR中的关键酶是具有热稳定性的DNA聚合酶即Taq酶；该酶的作用特点是热稳定性高即耐高温，不能从头合成DNA，只能从3’端延伸DNA链。

（3）根据题意和图示分析可知：由于Taq酶只能从3’端延伸DNA链，所以选择的引物是引物Ⅰ和引物Ⅱ。

考点：基因工程