Question

根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________和________。

(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：

AATTC……G

G……CTTAA

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是____________________________________

________________________________________________________________________。

(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即________DNA连接酶和________DNA连接酶。

(4)反转录作用的模板是________，产物是________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术。

(5)基因工程中除质粒外，________________和________________也可作为运载体。

(6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是________________________。

Answer

(1)黏性末端 平末端 (2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 (3)大肠杆菌（E.coli） T4 (4)mRNA(或RNA) cDNA(或DNA) PCR (5)噬菌体 动植物病毒 (6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱

【解析】

试题分析：(1)限制性核酸内切酶可以将DNA分子切成两种类型的末端，平末端和黏性末端。

(2)两种不同酶切割之后便于相连，所产生的黏性末端必须相同。

(3)ＥcoliDNA连接酶可以连接黏性末端，Ｔ４DNA连接酶可以连接两种末端。

(4)反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA，再合成双链DNA，利用ＰＣＲ技术进行大量扩增。

(5)基因工程中可以选用质粒，噬菌体、动植物病毒做载体。

(6)当受体细胞是细菌时，为了增大导入的成功率，常用Ca2+处理，得到感受态细胞，此时细胞壁和细胞膜的通透性增大，容易吸收重组质粒。

考点：基因工程