一个基因表达载体的构建不包括（ ）
A．目的基因 B．启动子 C．内含子 D．标记基因
胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。 （每空1分，共14分）
（1）从良种母牛采集的卵母细胞，都需要培养 期；从良种公牛采集的精子需_____＿＿
后才能进行受精作用，若在卵细胞膜和透明带之间看到两个极体是 ＿＿ 的标志
（2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持 ＿＿ 外，还需要提供CO2气体。（3）图中过程A称为___＿＿＿＿＿__，它在胚胎工程中的意义在于 。
对供、受体母牛进行选择，并用激素进行 ＿＿＿＿＿ 处理，常用 激素对供体进行 处理，获得更多的早期胚胎
（4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是 ；获得转基因母牛后，如果 即说明目的基因已经表达。
（5）若要通过胚胎移植获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到 ＿＿ 阶段的早期胚胎进行 ＿＿＿＿＿＿＿＿ 处理，再植入到受体内。若要对早期胚胎进行长期保存，应将其置于 ＿＿＿＿＿＿条件下。
人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答：
（1）制备单克隆抗体过程中要用到 ________ 和 ______ 技术。
（2）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCＧ相当于 ______ ，使小鼠产生分泌
相应 ___ 的 细胞，此过程属于特异性免疫中的 ____ 免疫。
（3）①过程除了采用物理法、化学法外，还可用_________________________。
（4）利用HAＴ培养基筛选出的细胞的特点是 。
（5）此过程生产的单克隆抗体的主要优点是 。
（6）动物细胞培养一般分为 和 两个阶段。为了防止细胞培养过程中微生物的污染，可向培养液中加入适量的 ，细胞培养所需气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是 。
融合蛋白是通过DNA重组技术将两个或多个基因的编码区首尾连接，由同一调控序列控制合成的蛋白质。人的表皮生长因子受体（EGFR）是影响癌症发生发展的重要因素，它在肺癌、脑肿瘤等实体瘤中均有大量表达。天花粉蛋白（TCS）是重要天花粉的有效成分，具有抗肿瘤作用。下图是通过基因工程方法将人表皮生长因子基因（EGF）和TCS基因连接起来，利用大肠杆菌生成人表皮生长因子—天花粉蛋白融合蛋白的过程示意图。请回答：
（1）为了建立含有EGF的cDNA文库，应从健康人体的 细胞中提取总mRNA，通过 法合成cDNA。从cDNA文库中提取的EGF的长度比从基因组文库中提取的EGF短。利用 技术可以大量扩增EGF，该技术所利用的原理是 。
（2）在①过程中，应使用的限制酶是 ，在融合蛋白基因的首端还应
插入 ，它是 识别和结合的位点。
（3）在②过程中，首先用_________________处理大肠杆菌，使其转变为_________________细胞。
（4）应用___________________ _技术可检测大肠杆菌是否表达出融合蛋白。
（5） 单纯使用天花粉蛋白治疗癌症疗效甚微，而人表皮生长因子——天花粉蛋白融合蛋白疗效显著，其原因是 。
（6）某同学为了筛选插入目的基因的表达载体，将处理过的载体分别置于含有氨苄青霉素和四环素的培养基上培养，观察其增殖和表达情况。此设计方案是否合理， 请说明理由 。
重症联合免疫缺陷病(简称SCID)是代表一组体液和细胞免疫严重缺陷的综合征。患者先天腺苷酸脱氨酶(ada)基因缺乏，不能抵抗任何微生物的感染，只能在无菌条件下生活。运用现代生物技术进行治疗，可以使患者的免疫功能得到很大的修复。下图表示治疗SCID的过程，据图回答下列问题：（5分）
(1)图中所示的治疗手段涉及到的生物技术有_______ ___ 、 。
(2)在这个实例中充当“分子运输车”的是 ，目的基因是 。
(3)利用骨髓移植技术也可以治疗该病。与本题所示的治疗方法相比，骨髓移植技术的不足
是_________________________ 。
下图为种间植物细胞融合再生植物示意图，请据图回答：
（1）步骤①利用 酶和 酶去除细胞壁。
（2）步骤②表示 ，常用的化学试剂是 试剂。物理方法有 （至少写出2种）。
（3）植物细胞融合成功的标志是_____________________。
（4）植物组织细胞具有 ，因此，可以利用组织培养技术将植物组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中的 、 。在④⑤培养过程中，培养基需要添加 、 等植物激素，且在操作与培养过程中除保证必要的温度、光照和氧气等外界条件外，还必须保证的关键条件
是 的环境。
（5）若亲本植物A与B都是二倍体，杂种植株为 倍体。从理论上讲，杂种个体的育性为可育。因此，该项研究其突出的优点是________________ 。
（6）动物细胞经诱导亦能融合，动物细胞融合技术最重要的用途是 。
