蛋白质工程中，直接需要进行操作的对象是（ ）
A．氨基酸结构 B．蛋白质的空间结构
C．肽链结构 D．基因结构
下列说法正确的是（ ）
A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器
B．用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌
C．质粒是基因工程中惟一用作运载目的基因的运载体
D．利用运载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程不能称为“克隆”
一个基因表达载体的构建不包括（ ）
A．目的基因 B．启动子 C．内含子 D．标记基因
胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。 （每空1分，共14分）
（1）从良种母牛采集的卵母细胞，都需要培养 期；从良种公牛采集的精子需_____＿＿
后才能进行受精作用，若在卵细胞膜和透明带之间看到两个极体是 ＿＿ 的标志
（2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持 ＿＿ 外，还需要提供CO2气体。（3）图中过程A称为___＿＿＿＿＿__，它在胚胎工程中的意义在于 。
对供、受体母牛进行选择，并用激素进行 ＿＿＿＿＿ 处理，常用 激素对供体进行 处理，获得更多的早期胚胎
（4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是 ；获得转基因母牛后，如果 即说明目的基因已经表达。
（5）若要通过胚胎移植获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到 ＿＿ 阶段的早期胚胎进行 ＿＿＿＿＿＿＿＿ 处理，再植入到受体内。若要对早期胚胎进行长期保存，应将其置于 ＿＿＿＿＿＿条件下。
人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答：
（1）制备单克隆抗体过程中要用到 ________ 和 ______ 技术。
（2）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCＧ相当于 ______ ，使小鼠产生分泌
相应 ___ 的 细胞，此过程属于特异性免疫中的 ____ 免疫。
（3）①过程除了采用物理法、化学法外，还可用_________________________。
（4）利用HAＴ培养基筛选出的细胞的特点是 。
（5）此过程生产的单克隆抗体的主要优点是 。
（6）动物细胞培养一般分为 和 两个阶段。为了防止细胞培养过程中微生物的污染，可向培养液中加入适量的 ，细胞培养所需气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是 。
融合蛋白是通过DNA重组技术将两个或多个基因的编码区首尾连接，由同一调控序列控制合成的蛋白质。人的表皮生长因子受体（EGFR）是影响癌症发生发展的重要因素，它在肺癌、脑肿瘤等实体瘤中均有大量表达。天花粉蛋白（TCS）是重要天花粉的有效成分，具有抗肿瘤作用。下图是通过基因工程方法将人表皮生长因子基因（EGF）和TCS基因连接起来，利用大肠杆菌生成人表皮生长因子—天花粉蛋白融合蛋白的过程示意图。请回答：
（1）为了建立含有EGF的cDNA文库，应从健康人体的 细胞中提取总mRNA，通过 法合成cDNA。从cDNA文库中提取的EGF的长度比从基因组文库中提取的EGF短。利用 技术可以大量扩增EGF，该技术所利用的原理是 。
（2）在①过程中，应使用的限制酶是 ，在融合蛋白基因的首端还应
插入 ，它是 识别和结合的位点。
（3）在②过程中，首先用_________________处理大肠杆菌，使其转变为_________________细胞。
（4）应用___________________ _技术可检测大肠杆菌是否表达出融合蛋白。
（5） 单纯使用天花粉蛋白治疗癌症疗效甚微，而人表皮生长因子——天花粉蛋白融合蛋白疗效显著，其原因是 。
（6）某同学为了筛选插入目的基因的表达载体，将处理过的载体分别置于含有氨苄青霉素和四环素的培养基上培养，观察其增殖和表达情况。此设计方案是否合理， 请说明理由 。
