Question

下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tet^R表示四环素抗性基因，amp^R表示氨苄青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、SmaI指示线所示为三种限制酶的酶切位点。

据图回答：

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用           限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含           的培养基上进行。

（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是      （填字母代号）。

A．启动子           B．tet^R              C．复制原点         D．amp^R

（3）过程①可采用的操作方法是             。 

（4）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这种技术实际上是一种      繁殖。

（5）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用               技术。

Answer

（1）HindⅢ和BamHⅠ；氨苄青霉素      （2）A    （3）显微注射

（4）无性        （5）抗原—抗体杂交

【解析】

试题分析：（1）据图，仅将人乳铁蛋白基因切割下来，需要在人乳铁蛋白基因的左侧用BamHⅠ切割，右侧用HindⅢ切割。当人乳铁蛋白基因和质粒连接成重组质粒后，tetR基因被人乳铁蛋白基因隔开，不是完整的，而ampR基因是完整的，所以筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要含氨苄青霉素的培养基上进行。

（2）启动子是基因表达调控的起始序列。

（3）目的基因导入动物细胞一般采用显微注射法。

（4）胚胎分割属于无性繁殖系。

（5）检测目的基因是否表达一般用抗原—抗体杂交技术。

考点：基因工程