Question

回答有关微生物的问题

急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的，故检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施。

（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种接种方法称为________________。下面4种菌落分布图中，不可能用该方法得到的是________。

（2）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？________。原因是               。

（3）如分别取0.1 mL已稀释10³倍的水样分别涂布到3个培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为_____________。

（4）已知大肠杆菌能发酵乳糖并产气。现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌（2分）？ _______________________________________________。

（5）为进一步分离大肠杆菌，需将检测出大肠杆菌的发酵管转种在加入____________的培养基中，培养一段时间，大肠杆菌菌落可呈现出__________________。

（6）手足口病的病原体是柯萨奇病毒。如需检测水样中是否有柯萨奇病毒，可以通过检测柯萨奇病毒特有的DNA片段来实现。基于水样中病毒DNA极少，故可通过                   技术（全称）增加病毒DNA片段，然后进行检测。

Answer

（1）（稀释）涂布平板法    D

（2）需要设置(对照组)      因为需要判定培养基是否被杂菌污染

（3）5.6×108个

（4）通过无菌操作向试管内注入一定量待检水样，再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37℃恒温箱培养24 h。若试管内有气泡生成的说明水样中有大肠杆菌（2分）

（5）伊红美蓝  金属光泽的紫黑色

（6）聚合酶链反应

【解析】

试题分析：（1）D是用的平板划线法。D错误；（2）见答案。（3）（55+56+57）/3*10000*1000=5.6/108个；（4）大肠杆菌产生乳酸是无氧呼吸，所以通过无菌操作向试管内注入一定量待检水样，再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37℃恒温箱培养24 h。若试管内有气泡生成的说明水样中有大肠杆菌（微生物培养的一般方法）；（5）是培养基具有选择的作用，加入伊红美蓝培养基，可用来鉴别大肠杆菌，如果有大肠杆菌，因其强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，菌体带H+，故菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。（6）PCR（聚合酶链反应）可以对对DNA进行扩增。

考点：本题旨在考查微生物的分离和培养、某种微生物数量的测定和培养基对微生物的选择利用，意在考查具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理，具有对一些生物学问题进行初步探究的能力。