Question

苦马豆素（SW）最早是从植物灰苦马豆中分离获得，为了研究SW是否具有抑制肿瘤细胞生长的作用，许多学者做了大量研究，请根据以下实验研究过程及研究结果回答问题。

①取小鼠肝癌Hepal-6细胞

②制成单细胞悬液，接种于多孔板，加入等量培养液，每组设5个平行孔

③于37℃、5%CO₂培养箱中分别培养24h

④加入等量不同浓度SW溶液，于37℃、5%CO₂培养箱中分别培养

⑤分别在24h、48h、72h时吸取培养液，观察结果，得到不同浓度SW对细胞存活率影响曲线（图1）

⑥将培养48h的培养液离心，细胞染色，在荧光显微镜下观察拍照，记录正常细胞和凋亡细胞数目，并采用免疫荧光细胞技术检测细胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达量状况，汇总统计结果（表1）

（1）实验中首先将小鼠肝癌Hepal-6细胞制成单细胞悬液，于37℃、5%CO₂培养箱中培养的目的是____________________________________。

（2）实验中对照组的处理方法应为_____________________________，利用多孔板培养时，每组设置5个平行孔同时进行培养，计数后统计平均值是为了_____________________________________。

（3）分析图1中曲线可知，SW对肝癌Hepal-6细胞作用效果的特点是：

①___________________________________________________________；

②____________________________________________________________。

（4）表1结果说明SW可以诱发细胞___________________，从分子水平上分析，SW可以导致癌细胞内__________的合成量增加，该基因表达的过程可以表示为______________________。

Answer

（1）细胞克隆（细胞分裂.细胞增殖）

（2）不加SW药物（或只加入等量的生理盐水）  减少误差使试验结果更可信

（3）①SW浓度越高，对细胞生长（存活）的抑制作用越强

（4）凋亡  Bax蛋白

【解析】

试题分析：（1）动物细胞培养，制成单个细胞，防止接触抑制，给予适宜的环境，使细胞克隆（细胞分裂、细胞增殖），为科研提供足够的材料；（2）空白对照，不加SW，多组测量为减小误差使实验结果更可信；（3）相同作用时间，不同SW浓度对小鼠肝癌Hepal-6细胞有抑制，且随着SW浓度增加，抑制作用增强；同一SW浓度，不同作用时间对对小鼠肝癌Hepal-6细胞有抑制，且随着SW作用时间增加，抑制作用增强。（4）由表1分析，随着SW浓度的增加，癌变的细胞减少，凋亡的细胞增多，可以得出SW可以诱导细胞凋亡，同时可以看出Bax蛋白随着SW浓度增加而增加，该基因表达的过程可以表示为Bax基因转录形成mRNA，mRNA翻译成Bax蛋白。

考点：本题考查动物的细胞培养与体细胞克，意在考查具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。