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回答下列关于基因工程的问题。 草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内E...

回答下列关于基因工程的问题。

草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成,最终导致植物死亡。但是,它的使用有时也会影响到植物的正常生长。目前,已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入植物细胞内, 从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦。

下图A-F表示6株植物,其中,植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过了转基因处理,但是是否成功还未知。图1和2分别表示两段DNA序列。表格中1-4分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点。据图回答下列问题:

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(1)若A-C浇清水,D-F浇的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成长的是_________。

(2)若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲,在大肠杆菌培养基中还必须加入 ___________。

(3)假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列均如图1所示,则应选择表中酶__________进行酶切;若位于EPSPS基因两侧的DNA序列分别如图1和2所示,则应选择表中酶__________ 进行酶切。

(4)假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图2所示,请在方框内画出经酶切后产生的两个末端的碱基序列。(2分)

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(5)假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F仍没有表现出抗性,分析可能的原因_____________。

下图甲是某目的基因(4.0kb,1kb=1000对碱基)与大肠杆菌pUC18质粒(2.7kb)重组的示意图。图中Ap′是抗氨苄青霉素基因,lacZ是显色基因,其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧,其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色。(图乙中深色圆点即为蓝色菌落)

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(6)图乙的培养基中含有氨苄青霉素,请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中,何种会含有重组质粒。___________。

(7)现用EcoRI酶切质粒,酶切后进行电泳观察,若出现长度为_________kb和       kb的片段,则可以判断该质粒已与目的基因重组成功。(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对忽略不计)

 

(1)ABCE    (2)草甘膦    (3)2      2和3 (4) (画完整给2分,要求画出化学键、碱基序列完整且正确) (5)目的基因在受体细胞中没有表达或表达的酶没有活性 (6)白色 (7)3kb和3.7kb或1.0kb和5.7kb 【解析】 试题分析:(1)根据题意分析可知:植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过了转基因处理,所以A-C浇清水,都能健康成长。F虽经过了转基因处理,但是是否成功还未知,所以D-F浇的水中含有草甘膦,D肯定不能健康成长,E肯定能健康成长,F未知。因此肯定能健康成长的是ABCE。(2)要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株,则必须要用含草甘膦的选择培养基培养大肠杆菌。(3)因为限制酶具有特异性识别的能力,对照图1所示,所以应选择表中酶2进行酶切。对照图1和2所示,则应选择表中酶2和3同时进行酶切。(4)画图要求:画出完整的DNA片段,要有两个黏性末端,化学键、碱基序列完整且正确。(5)假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,说明F中已含有EPSPS基因,如果仍没有表现出抗性,则说明EPSPS基因在受体细胞中没有表达或表达的酶没有活性。(6)白色,因为EcoRI将lacZ显色基因破坏了。(7)目的基因被酶切后形成两个片段:1.0kb和3.0kb;质粒被酶切后长度不变:2.7kb。故质粒只能和目的基因片段之一发生重组,如果成功的话将会出现两种情况:3kb和3.7kb或1.0kb和5.7kb。 考点:本题重点考查基因工程的有关知识,要求掌握基因工程的操作步骤及在生产实践中的运用,意在考查考生理解所学知识的要点,并学会运用生物学知识分析具体问题的能力。
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考点分析:
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根据有关微生物的知识,分析回答问题。

(1)当水体过于纯净时,硝化细菌会形成休眠体,这种休眠体被称为        

(2)对于混有硝化细菌、蓝细菌和大肠杆菌的悬浮液,可利用选择性培养基进行微生物筛选。筛选硝化细菌的培养基成份包括                               (供选:葡萄糖、纤维素、牛肉膏、(NH42SO4、KNO3、无机盐、琼脂、伊红-美蓝染料、H2O),制备培养基时,灭菌与调pH值的先后顺序是               

(3)如利用上述培养基筛选大肠杆菌菌落,则应另外添加的成份是          ,菌落特征为           

(4)将采自养殖池中的水样1ml稀释100倍,然后吸取稀释后的水样1ml,接种于上述硝化细菌选择性培养基上培养,接种所使用的工具是            。一段时间后观察菌落并计数,实验重复三次结果如右图。该养殖池每毫升水含有硝化细菌        个。

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阅读材料,分析有关生物进化和生物多样性的问题。

材料1.某些动物在不同季节中数量差异很大:春季繁殖,夏季数量增加,到了冬季又由于寒冷、缺少食物等原因而大量死亡。第二年春季,由残存的少量个体繁殖,再使数量增多。由此形成一个如瓶颈样的模式(见图)。

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(1)在图示的三年间,第一年夏季●基因的频率为2%,第二年夏季●基因的频率为3%,第三年夏季●基因的频率为0%,该生物种群是否发生进化? 理由是                                     

(2)使用农药防治害虫,保留了突变出抗药性基因的个体。其实质是依赖      的选择作用,提高该害虫种群中           的频率。而经过越冬的瓶颈样模式,抗药性个体不耐寒冷而死亡,导致下一年该害虫种群中抗药性基因频率又下降。抗药性基因的出现,对该害虫来说是有利还是有害?               (有利/有害/取决于环境的变化)。

材料2.图中地雀A与B可以交配并产生可育后代,地雀C与A、B之间不能互相交配。

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(3)若干年后,岛屿上出现地雀新种C。它的进化机制是:“地雀种群本来就存在着基因频率的变化;大陆与岛屿不同的环境引起不同的自然选择;由于           隔离,阻断两处种群的基因交流,导致两处种群的基因频率向不同的方向变化;当基因频率的变化达到一定程度时,由于          隔离,形成新种C。”

(4)从图1 至图3的演变,反映了生物多样性发展的规律是                      

 

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Ⅰ.人类染色体异常会造成流产、痴呆等疾病。人类第7号染色体和第9号之间可以发生相互易位如图甲所示,但易位后细胞内基因结构和种类未发生变化;后代如果出现9号染色体“部分三体”(细胞中出现9号染色体的某一片断有三份),则表现为痴呆病患者,如果出现9号染色体“ 部分单体”(细胞中出现9号染色体的部分缺失),后代早期流产。乙图为由于发生第7和第9号染色体之间易位而导致的流产、痴呆病系谱图,已知Ⅰ—2、Ⅱ—2为甲图所示染色体易位的携带者。

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(1)个体Ⅰ-2的7或9号染色体上基因 的               发生了改变。

⑵个体Ⅱ-2能够产生         种配子。

⑶写出个体Ⅲ-1的7和9号染色体组合                  (用甲图中的字母表示)。

⑷早期流产导致胎儿不能成活。Ⅲ-3为7/9染色体易位携带者的概率是            

⑸为防止生出患染色体异常遗传病的孩子,建议婚前进行            ,妊娠期间进行               

Ⅱ.二倍体结球甘蓝的紫色叶对绿色叶为显性,控制该相对性状的两对等位基因(A、a和B、b)分别位于3号和8号染色体上。下表是纯合甘蓝杂交试验的统计数据:

亲本组合

F1株数

F2株数

紫色叶

绿色叶

紫色叶

绿色叶

①紫色叶×绿色叶

121

0

451 

30  

②紫色叶×绿色叶

89

0

242 

81  

请回答:

(6)结球甘蓝叶性状的遗传遵循               规律。

(7)表中组合①中紫色叶亲本基因型为          ,理论上组合①的F2紫色叶植株中,纯合子所占的比例为      

 

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要获得遗传特性单一的枯草杆菌菌种,一般必须对原有的菌种进行扩大培养、并利用纯化技术得到单菌落的菌种。请回答以下问题:

⑴获得纯净枯草杆菌的关键是  ,为此,必须对培养皿、接种用具和培养基进行严格灭菌。在接种或倒平板操作时,除了在超净台上进行操作并对实验者的衣着、手和实验空间进行严格清洁和消毒外,还必须  ,以防止空气中的杂菌污染。

⑵下图是纯化枯草杆菌的方法,该纯化分离方法的名称是 

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⑶枯草杆菌可以产生α-淀粉酶,以下是利用诱变育种方法培育获得产

生较多淀粉酶菌株的主要实验步骤。(原理:菌株生长过程中可释放淀

粉酶分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈。)

第一步:将枯草杆菌接种到液体培养基上进行扩大培养。

第二步:将枯草杆菌分成A、B两组, 

第三步:制备多个含淀粉的固体培养基。

第四步:将A、B组分别稀释后,分别在含淀粉的固体培养基上利用  法分离,适宜条件下培养得到单菌落。

第五步:观察A、B组各菌落周围的   

实验结果预期:据诱发突变率低的特点,预期 

据诱发突变不定向性的特点,预期 

 

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口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病,目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VPI。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗,过程如下图1所示。图2表示目的基因与pZHZ1质粒构建重组质粒的过程,E、F、G、H分别为A、B、C、D四种不同限制酶的酶切位点。请据图回答。

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⑴口蹄疫病毒的遗传物质为RNA,要获得VPI基因可通过        方法获得。

⑵如图2所示,若限制酶A、B切割出的末端完全不同,那么用这种双酶切的方法构建重组质粒的优点是 

⑶已知质粒pZHZ1的长度为3.7kb,(1kb=1000对碱基)其中EF区域长度为0.2kb,GE区域长度为0.8kb,FH区域长度为0.5kb。现分别用限制酶G、H切割重组质粒pZHZ2样品,结果被酶G切割成1.6kb和3.1kb两个片段,被酶H切割成1.2kb和3.5kb两个片段。据酶切结果判断VPI基因大小为   kb,并将目的基因内部的酶G、酶H切割位点用相应的字母标注在答案纸的对应位置 

⑷过程⑥的培养基中除了加入各种必需营养物质和  等激素外,还需要添加   筛选出含有重组质粒的叶片小段。

⑸获得表达VPI蛋白的番茄植株以后,需要进行免疫效力的测定。具体方法是:将转基因番茄叶片提取液注射到豚鼠体内,每半个月注射一次,三次后检测豚鼠血液内产生的   的数量。

 

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