Question

科学家将人的生长激素基因与某种细菌（不含抗生素抗性基因）的DNA分子进行重组，并成功地在该细菌中得以表达（如下图）。请据图分析回答：

（1）过程①所示获取目的基因的方法是        。

（2）细菌是理想的受体细胞，这是因为它                     。（2分）

（3）质粒A与目的基因结合时，首先需要用          酶将质粒切开“缺口”，然后用

       酶将质粒与目的基因“缝合”起来。

（4）若将细菌B先接种在含有__________的培养基上能生长，说明该细菌中已经导入外源质粒，但不能说明外源质粒是否成功插入目的基因；若将细菌B再重新接种在含有______________的培养基上不能生长，则说明细菌B中已经导入了插入目的基因的重组质粒。

（5）检测工程菌中的生长激素基因是否转录出mRNA和是否翻译出生长激素，可采用的技术分别是____________________、_____________________。

Answer

（1）反转录法（逆转录法）

（2）繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少

（3）限制性内切酶        DNA连接酶

（4）氨苄青霉素       四环素   

（5）分子杂交       抗原——抗体杂交

【解析】

试题分析：（1）过程①人生长激素基因的RNA→人生长激素基因，属于反转录法。（2）细菌是理想的受体细胞，原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少。（3）质粒A与目的基因结合时，首先用限制性内切酶分别处理质粒和目的基因，使之形成相同的黏性末端，然后用DNA连接酶将质粒与目的基因“缝合”起来。（4）基因必须保持结构的完整性才能表达，而抗氨苄青霉素基因结构完整，能够表达而使细菌具有对氨苄青霉素的抗性，在含有氨苄青霉素的培养基上能存活的是导入了质粒或导入了插入目的基因的重组质粒的细菌。由于将人的生长激素基因导入到质粒的抗四环素基因上，破坏了抗四环素基因的完整性，导入了插入目的基因的重组质粒的细菌没有对四环素的抗性，在含有四环素的培养基上不能存活，能存活的是质粒。（5）检测是否转录出mRNA和是否翻译出生长激素，可采用的技术分别是分子杂交、抗原-抗体杂交。

考点：基因工程的工具和步骤。