Question

（15分）植物的花药培养在育种上有特殊的意义。植物组织培养可用于无病毒植株及细胞产物的工厂化生产等方面。请回答相关问题。

（1）诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低的主要影响因素是__________和培养基的组成。利用月季的花药离体培养产生单倍体时，一般来说，在      期花药培养的成功率最高。为了选择该期的花药，通常选择            的花蕾。确定花粉发育时期最常用的方法有        法，但是对于花粉细胞核不易着色的植物，需采用            法，该法能将花粉细胞核染成        色。

（2）若要进行兰花无病毒植株的培育，从外植体到无病毒植株试管苗，要人为控制细胞的

____________和         过程。

（3）进行组织培养需配制MS培养基，在该培养基中常需要添加  　　    、     ____  等激素。欲利于根的分化，植物激素的用量比例应为                 。

（4）在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，___________的数目常常会发生变化，因此还需要对培养出来的植株进行_______________。

（5）无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，下列各项中使用化学药剂进行消毒的是        ，采用灼烧方法进行灭菌的是         。（答序号）

①培养皿  ②培养基  ③实验操作者的双手  ④三角锥形瓶  ⑤接种环  ⑥花蕾

Answer

（1）材料的选择  单核靠边  完全未开放  醋酸洋红  焙花青—铬矾  蓝黑（2）脱分化（或去分化）  再分化（3）生长素、细胞分裂素   生长素多于细胞分裂素（4）染色体组 鉴定和筛选（5）③⑥（少答、错答均不给分） ⑤

【解析】

试题分析：

（1）诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低，受多种因素的影响，其中材料的选择和培养基的组成的是主要的影响因素。不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体，在花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。为了选择单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。确定花粉发育时期最常用的方法有醋酸洋红法。但是，对于花粉细胞核不易着色的植物，需采用焙花青—铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。

（2）植物组织培养包括脱分化（或去分化）和再分化两个过程。

（3）决定植物脱分化和再分化的关键因素是：植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。所以在植物组织培养的培养基中常需要添加生长素、细胞分裂素等激素。当生长素含量高于细胞分裂素时，主要诱导植物组织脱分化和根原基的形成；而当细胞分裂素的效应高于生长素时，则主要诱导植物组织再分化和芽原基的形成。

（4）在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性的变化。因此还需要对培养出来的植株进行鉴定和筛选。

（5）常用到的消毒方法有煮沸消毒法和巴氏消毒法，此外也常使用化学药剂进行消毒，如用酒精对花蕾进行消毒，用酒精擦拭双手等。微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属用具直接采用灼烧方法进行灭菌。

考点：本题考查月季的花药培养和微生物的实验室培养的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。