若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因(1.2 kb),并将之取代质粒pZHZ1(3.7 kb,1 kb=1000对碱基)上相应的EF区域(0.2 kb),形成重组质粒pZHZ2,请据图回答下列问题:
图7-16-1
(1)限制酶E和限制酶F在结构和功能上的不同之处分别在于
①______________________;②______________________。
(2)pZHZ2所含有的碱基对数为________kb。
(3)将重组质粒pZHZ2导入至山羊的受精卵细胞中,若pZHZ2进入细胞后插入在一条染色体DNA上,那么获得转基因纯合子山羊的方式是____________________。
(4)上述目的基因模板链中的TGA序列对应一个密码子,翻译时识别该密码子的tRNA上相应的反密码子碱基序列是________。
有机磷化合物在农业生产中作为杀虫剂被广泛使用,长期以来因使用其量大、范围广,容易造成水体污染等诸多环境问题。
(1)为了筛选甲胺磷的降解细菌,将农药厂的甲胺磷污染土壤悬液涂布在______________________的固体培养基上进行培养,可以对降解菌进行定向的________。
(2)在分离得到的菌株A中检测到的ophc2蛋白,可以催化甲胺磷的降解,这种蛋白质是在细胞的________上合成的。若要定量分析ophc2蛋白的催化能力,应测定单位时间内______________。
(3)为了测定菌株A的降解效率,应配置0 mg/L、10 mg/L、30 mg/L、50 mg/L、70 mg/L的甲胺磷溶液,测定不同浓度甲胺磷溶液的吸光值,画出标准曲线,得到吸光值与甲胺磷浓度的关系:y=0.02x-0.01,如图7-15-6所示。
图7-15-6
将含有100 mg/L甲胺磷的菌株A培养液分别在不同温度下培养5天后,测定吸光值,结果如下表所示,已知降解率=(初始甲胺磷浓度-降解后甲胺磷浓度)/初始甲胺磷浓度,则取得的最大降解率为________(忽略细菌对吸光值的影响和培养液体积变化),若甲胺磷自身化学分解,则计算的降解率数值会________(填“偏大”“不变”或“偏小”)。
温度/℃ | 15 | 20 | 25 | 30 | 35 | 40 |
吸光值(菌株A) | 1.71 | 1.53 | 1.15 | 0.49 | 1.32 | 1.89 |
(4)继续分析细菌的16S rDNA可以鉴定种类,提取得到菌株A的DNA后,通过____________扩增得到大量的16S rDNA,进而对细菌分类。
(5)导入ophc2基因的烟草可获得降解有机磷的能力,烟草花粉的遗传物质存在于细胞核和线粒体中,为了避免转基因烟草的花粉对野生型烟草造成基因污染,可将ophc2基因导入烟草细胞的________中。
玫瑰被誉为“花中皇后”,玫瑰精油也是世界上最贵的“液体黄金”。如图7-15-5为玫瑰精油的实验流程,请分析回答:
图7-15-5
(1)玫瑰精油适合用________蒸馏法提取。在操作时可向蒸馏烧瓶中加入几片碎瓷片,目的是__________。
(2)为确保玫瑰精油的提取,应选择鲜玫瑰花与清水的比值是________。当蒸馏瓶中的水和原料量一定时,蒸馏过程中影响精油提取量的主要因素有________和________。
(3)油水混合物需加入________,以加速油水分层。分离的油层中还含有一定的水分,需加入________处理。
(4)玫瑰精油的提取需大量原料,通常采用____________技术实现玫瑰的快速繁殖。
孔雀石绿(C23H25N2Cl)常用作纺织业的染料,也可用作水产养殖业的杀菌驱虫剂。但它具有高毒性、高残留的危害,因此对孔雀石绿废水的处理已成为环境科学领域关注的热点。科研人员从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A。主要步骤如图7-15-3所示。
图7-15-3
请分析并回答:
(1)从①到③的培养过程中,培养液应加入________作为唯一碳源,此过程的目的是________________________和________________________。
(2)使用____________法可以在④上获得单个菌落。实验中使用的培养基可以用________灭菌法进行灭菌。
(3)从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A,从生物进化的角度分析,这是________的结果。菌株A在生态系统成分中属于________。
(4)研究人员进一步研究了不同金属离子对菌株A降解孔雀石绿的影响,实验结果如图7-15-4所示。
由上述结果可以看出,与不加金属离子的对照组相比,多数金属离子对菌株A降解孔雀石绿有________作用,唯有Pb2+的作用相反。若要排除Pb2+本身对孔雀石绿有降解作用,则应设置__________________________的培养基样本作为对照。
图7-15-4
辣椒素是辣椒果实中普遍存在的一种生物碱,广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图7-15-2所示。请回答下列问题:
图7-15-2
(1)图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的______和________过程。
(2)图中所用的MS培养基主要成分应包括:大量元素、微量元素、有机物(如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、以及__________等),还需要添加多种植物激素,如生长素和细胞分裂素。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值________(填“高”或“低”)时,有利于芽的分化。所用的培养基必须彻底灭菌,一般应采取的灭菌方法是________________________________________________________________________。
(3)培养外植体的培养基一般是固体培养基,需要加入凝固剂________。并且,在培养获得辣椒脱毒苗的过程中,除无菌操作外,还需要注意pH、________、________等条件的控制。
(4)图中第二条获得辣椒素途径:用酶解法将愈伤组织分离成单细胞,再选择高产细胞系进行培养。分散的细胞能快速增殖,提取的有效成分比从辣椒果实中提取更充分。酶解法用到的酶有________酶和________酶。
(5)辣椒素是一种斥水亲脂、易溶于乙醇、丙酮等有机溶剂的化合物。可以采用________法提取辣椒素,该方法需要对原材料进行____________,再用酒精、丙酮等浸泡,并利用________加热方法加热,加热瓶口安装回流冷凝装置,目的是__________________。通过过滤获得滤液,若要获得辣椒素结晶,还需再对滤液加热蒸发出有机溶剂,这时可以直接使用________装置进行。
图7-15-1表示葡萄酒酿制的简单过程,请据图分析回答:
(1)从图7-15-1可知,甲图是为了使酵母菌进行__________,以增加酵母菌的数量,乙图是为了使酵母菌______获得葡萄酒。最后,可以用________试剂检验是否有酒精生成。整个酿制过程一般将温度控制在18~25 ℃,原因是______________________________。
图7-15-1
(2)甲图中葡萄汁和白糖的混合液为酵母菌提供的营养成分有________________________。为防止发酵液被污染,对使用的器具要________并晾干,并用__________消毒。
(3)从野生酵母菌群中分离纯化酵母菌时, 最常用的接种方法有__________________和____________________两种。接种后,培养基上会出现一些分别由一个酵母菌繁殖而成的菌落,在生态学上,这些菌落被称为________。
(4)工业生产上为提高葡萄出汁率并使果汁变得澄清,生产中常需用到________。为了能反复利用酵母菌,需要将纯化后并经过繁殖培育得到的酵母菌与海藻酸钠溶液混合制成“凝胶珠”,这是使用________法来固定酵母细胞。