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红细胞生成素(EPO)是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病。目前临床使用的是重组人红细胞生成素(rhEPO),其简易生产流程如图7163所示。请回答问题:

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7163

(1)图中所指的物质是________所指的物质是________

(2)基因表达载体导入中国仓鼠卵巢细胞系(CHO)最常采用的方法是____________,它的启动子是__________的识别和结合部位。

(3)CHO是仓鼠的卵巢细胞经过细胞培养过程中的____________________培养获得的无限增殖细胞。重组CHO细胞培养需要____________的环境,及营养、温度、pH和气体环境适宜的条件。

(4)检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。单克隆抗体的优点是____________________,并可大量制备,它是由小鼠的骨髓瘤细胞与其特定B淋巴细胞通过____________技术获得的杂交瘤细胞分泌的。

 

(1)mRNA rhEPO (2)显微注射法 RNA聚合酶 (3)原代培养和传代 无菌、无毒 (4)特异性强、灵敏度高 动物细胞融合 【解析】(1)①是由人胚胎干细胞中提取出来,并能通过反转录形成cDNA,最后通过筛选获得人红细胞生成素(rhEPO)的基因,进行反转录的模板是mRNA,故①为mRNA,②为rhEPO。 (2)将重组DNA分子导入到动物细胞中最常用的方法是显微注射法,启动子和终止子在DNA上,在遗传信息转录时起调控作用,即启动子是RNA聚合酶的识别和结合部位。 (3)重组CHO细胞来自经检测、筛选后的中国仓鼠卵巢细胞系中,细胞系是指当细胞经原代培养后细胞传到50代以后的部分细胞,这些细胞的遗传物质发生了改变,并且带有癌变的特点,从而有可能在适宜的培养条件下无限制地传代下去。细胞培养过程始终都处于无菌、无毒环境,并且还需要适宜的温度、pH和全营养培养基。 (4)与常规抗体相比,单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的优点。用于大量生产单克隆抗体的细胞是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞。  
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根据图7162回答相关问题:

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7162

(1)过程中使用了__________________酶,以使植物原生质体相互分离,此处使用的溶液浓度较大,保证植物细胞会发生________,以保护细胞原生质体不被破坏;在动物细胞培养技术中,使细胞分离开来的酶是________

(2)处的细胞与处的细胞相比,最大的区别是不具有________;动物细胞与处的细胞相比,在功能上的特点是不具有______________

(3)过程________属于再分化;动植物细胞发生分化的根本原因都是________________________

(4)③处的细胞在化学药剂__________的作用下,会发生细胞融合;动物细胞融合方法与植物细胞不相同的是__________________________

(5)(多选)下列关于细胞工程的叙述中,错误的是(    )

A培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压

B培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化

C.⑥处的细胞都必须通过细胞分裂才能形成愈伤组织

D同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同

E动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现

 

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若用两种识别切割序列完全不同的限制酶EF从基因组DNA上切下目的基因(1.2  kb),并将之取代质粒pZHZ1(3.7  kb1  kb1000对碱基)上相应的EF区域(0.2  kb),形成重组质粒pZHZ2,请据图回答下列问题:

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7161

(1)限制酶E和限制酶F在结构和功能上的不同之处分别在于

____________________________________________

(2)pZHZ2所含有的碱基对数为________kb

(3)将重组质粒pZHZ2导入至山羊的受精卵细胞中,若pZHZ2进入细胞后插入在一条染色体DNA上,那么获得转基因纯合子山羊的方式是____________________

(4)上述目的基因模板链中的TGA序列对应一个密码子,翻译时识别该密码子的tRNA上相应的反密码子碱基序列是________

 

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有机磷化合物在农业生产中作为杀虫剂被广泛使用,长期以来因使用其量大、范围广,容易造成水体污染等诸多环境问题。

(1)为了筛选甲胺磷的降解细菌,将农药厂的甲胺磷污染土壤悬液涂布在______________________的固体培养基上进行培养,可以对降解菌进行定向的________

(2)在分离得到的菌株A中检测到的ophc2蛋白,可以催化甲胺磷的降解,这种蛋白质是在细胞的________上合成的。若要定量分析ophc2蛋白的催化能力,应测定单位时间内______________

(3)为了测定菌株A的降解效率,应配置0  mg/L10  mg/L30  mg/L50  mg/L70  mg/L的甲胺磷溶液,测定不同浓度甲胺磷溶液的吸光值,画出标准曲线,得到吸光值与甲胺磷浓度的关系:y0.02x0.01,如图7156所示。 

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7156

将含有100  mg/L甲胺磷的菌株A培养液分别在不同温度下培养5天后,测定吸光值,结果如下表所示,已知降解率=(初始甲胺磷浓度-降解后甲胺磷浓度)/初始甲胺磷浓度,则取得的最大降解率为________(忽略细菌对吸光值的影响和培养液体积变化),若甲胺磷自身化学分解,则计算的降解率数值会________(偏大”“不变偏小”)

温度/℃

15

20

25

30

35

40

吸光值(菌株A)

1.71

1.53

1.15

0.49

1.32

1.89

(4)继续分析细菌的16S  rDNA可以鉴定种类,提取得到菌株ADNA后,通____________扩增得到大量的16S  rDNA,进而对细菌分类。

(5)导入ophc2基因的烟草可获得降解有机磷的能力,烟草花粉的遗传物质存在于细胞核和线粒体中,为了避免转基因烟草的花粉对野生型烟草造成基因污染,可将ophc2基因导入烟草细胞的________中。

 

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玫瑰被誉为花中皇后,玫瑰精油也是世界上最贵的液体黄金。如图7155为玫瑰精油的实验流程,请分析回答:

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7155

(1)玫瑰精油适合用________蒸馏法提取。在操作时可向蒸馏烧瓶中加入几片碎瓷片,目的是__________

(2)为确保玫瑰精油的提取,应选择鲜玫瑰花与清水的比值是________。当蒸馏瓶中的水和原料量一定时,蒸馏过程中影响精油提取量的主要因素有________________

(3)油水混合物需加入________,以加速油水分层。分离的油层中还含有一定的水分,需加入________处理。

(4)玫瑰精油的提取需大量原料,通常采用____________技术实现玫瑰的快速繁殖。

 

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孔雀石绿(C23H25N2Cl)常用作纺织业的染料,也可用作水产养殖业的杀菌驱虫剂。但它具有高毒性、高残留的危害,因此对孔雀石绿废水的处理已成为环境科学领域关注的热点。科研人员从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A。主要步骤如图7153所示。

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7153

请分析并回答:

(1)的培养过程中,培养液应加入________作为唯一碳源,此过程的目的是________________________________________________

(2)使用____________法可以在上获得单个菌落。实验中使用的培养基可以用________灭菌法进行灭菌。

(3)从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A,从生物进化的角度分析,这是________的结果。菌株A在生态系统成分中属于________

(4)研究人员进一步研究了不同金属离子对菌株A降解孔雀石绿的影响,实验结果如图7154所示。

由上述结果可以看出,与不加金属离子的对照组相比,多数金属离子对菌株A降解孔雀石绿有________作用,唯有Pb2的作用相反。若要排除Pb2本身对孔雀石绿有降解作用,则应设置__________________________的培养基样本作为对照。

 

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7154

 

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