Question

在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。

请据图回答：

（1）A过程需要的酶有__________________________________________。

（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是____________________。

（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________________。

（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用________________作为探针。

（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。

①将转基因植株与_________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。

②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。

③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占____________%。

Answer

（1）限制性内切酶和DNA连接酶 （2）具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存 （3）卡那霉素 （4）放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因（5）①非转基因植株 ②3：1 ③100

【解析】

试题分析：（1）构建重组质粒需要限制性内切酶和DNA连接酶 。

（2）B过程对导入重组质粒的农杆菌培养选择，根据质粒的标记基因对应性状进行选择成功导入目的基因农杆菌，故质粒作为运载体必须具备的两个条件是具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存。

（3）C过程要进行选择导入目的基因棉花细胞，必须在培养基加入卡那霉素进行选择。

（4）利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，要用放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因作为DNA探针,检测植株染色体DNA是否插入目的基因。

（5）①假设卡那霉素抗性基因为A，则转基因植株为A0，相当显性杂合子，非转基因植株为00，相当隐性纯合子，二者杂交，子代为1 A0（抗性）:100（敏感）。

②A0自交，子代为3A_(抗性):1OO（敏感）。

③将该转基因植株的花药A0有A（抗性）和O（敏感）两种，只有A（抗性）花药能够在卡那霉素培养基上生存，故在卡那霉素培养基培养出的花药全部为A（抗性），培养成的植株全部是抗卡那霉素型。

考点：本题考查基因工程和细胞工程相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力；能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论能力。