Question

（10分）下图是将人的生长激素基因导入细菌细胞B制造工程菌的示意图。已知细菌细胞B不含质粒A，也不含质粒A上的基因。质粒A导入细菌细胞B后，其上的基因能得到表达。请回答下列问题

（1）目的基因可通过PCR技术获取，这一技术中需要的酶是         。

（2）将目的基因与质粒结合形成重组质粒的过程中，需要的工具酶有_______________。

（3）若要检测目的基因是否导入，可在培养细菌B的培养基中加入__________，若在培养基上观察到大量的细菌B的菌落，表明目的基因已成功导入细菌。检测工程菌是否产生出生长激素的方法是      

（4）将重组质粒导入细菌B的过程称为              。

Answer

（1）热稳定（耐高温）的DNA聚合酶（Taq）酶

（2）限制性核酸内切酶 DNA连接酶

（3）四环素 抗原—抗体杂交

（4）转化

【解析】

试题分析：（1）PCR扩增反应需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苷酸和热稳定（耐高温）的DNA聚合酶（Taq）酶。

（2）在基因工程操作过程中，将目的基因与质粒结合形成重组质粒的过程中，需要的工具酶限制性核酸内切酶和DNA连接酶。限制性核酸内切酶是剪刀，DNA连接酶是针线。

（3）检测质粒或重组质粒是否导入受体细胞，均需利用质粒上某些标记基因的特性，即对已经导入质粒或重组质粒处理的、本身无相应特性的受体细胞进行检测，根据受体细胞是否具有相应的特性来确定。本题利用质粒上抗四环素和抗氨苄青霉素这两个特性以及它们在质粒上的位置进行目的基因是否导入受体细胞的检测。但抗氨苄青霉素基因被目的基因破坏所以只能利用抗四环素基因经过这种选择培养基培养经过导入质粒处理的受体细胞，凡能生长的则表明质粒导入成功；不能生长的则无质粒导入。基因成功表达的标志是受体细胞通过转录、翻译过程合成出相应的蛋白质，即人的生长激素。检测目的基因基因是否表达利用抗原—抗体杂交。

（4）将重组质粒导入受体细胞称为转化。

考点：本题以基因工程为素材，考查基因工程的具体过程，即基因的剪刀，分子针线，以及目的基因的检测与鉴定的相关知识，意在考查考生理解基因操作的要点，把握知识间的内在联系的能力；能独立完成基因工程的基础知识，掌握相关的考点，并能将所学知识进行综合运用。