1957年,生物学家了解到,病毒感染的细胞能产生一种因子,这种因子能作用于其他细胞,干扰病毒的复制,故将其命名为干扰素;从1987年开始,用基因工程方法生产的干扰素进入了工业化生产,并且大量投放市场。
(1)若已知干扰素的氨基酸序列,则获取目的基因的较简单方法是________;目的基因还可以从________文库获取,而从cDNA文库中不一定能得到,原因是______________________________。
(2)用限制酶处理质粒和目的基因后,用________酶处理,可形成基因表达载体,该载体的化学本质是________。
(3)转基因技术是否成功,需要对受体细胞进行分子水平的检测,首先是检测受体细胞________上是否插入了目的基因,这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。检测方法是采用________。最后还要检测目的基因是否翻译成了相应的蛋白质,利用的技术是________。
如图是利用基因工程技术培育转基因植物,生产可食用疫苗的部分过程示意图,其中Pst Ⅰ、Sma Ⅰ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性内切酶。下列说法错误的是( )。
A.图示过程是基因工程的核心步骤
B.表达载体构建时需要用到限制酶Sma Ⅰ
C.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来
D.除图示组成外,表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构
右图为表达载体的模式图,若结构X是表达载体所必需的,则X最可能是( )。
A.氨苄青霉素抗性基因
B.启动子
C.限制酶
D.DNA连接酶
限制性核酸内切酶EcoRⅠ对DNA的识别序列是5′GAATTC3′,当用它处理环状DNA分子时,可形成( )。
A.两端相同的线性DNA,有黏性末端
B.两端相同的线性DNA,无黏性末端
C.两端不同的线性DNA,一端有黏性末端,一端无黏性末端
D.两种末端无法判断
科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下面的问题。
(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增,该技术须用________酶,所需的原料是________。
(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点(如下表):
限制酶 | BamHⅠ | Hind Ⅲ | EcoR Ⅰ | Sma Ⅰ |
识别序列及 切割位点 |
用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ酶切割,原因是
__________________________________________________________________
_________________________________________________________________。
图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用________酶对外源DNA、质粒进行切割。
(3)图中⑤、⑥依次表示组织培养过程中抗盐烟草细胞的________、________过程。
(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是___________________________________________________。
在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。
请据图回答下面的问题。
(1)A过程需要的酶有___________________________________________。
(2)B过程及其结果体现了质粒作为载体必须具备的两个条件是
________________________________________________________________。
(3)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入________。
(4)在D过程中,抗虫基因遗传信息的传递过程是_____________________。
(5)获取真核生物的基因常用的方法是______________,包括_____________。
(6)如果利用DNA分子杂交原理对再生植物进行检测,D过程应该用
_______________________________________________________作为探针。
(7)科学家在进行实验过程中,采用了两种方案:一是将抗虫基因导入离体的棉花叶片细胞进行植物组织培养;请你想另外一种方案:可以将抗虫基因导入植物的________中,再进行培养,导入成功的标志是
_______________________________________________________________。