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1957年,生物学家了解到,病毒感染的细胞能产生一种因子,这种因子能作用于其他细...

1957年,生物学家了解到,病毒感染的细胞能产生一种因子,这种因子能作用于其他细胞,干扰病毒的复制,故将其命名为干扰素;从1987年开始,用基因工程方法生产的干扰素进入了工业化生产,并且大量投放市场。

(1)若已知干扰素的氨基酸序列,则获取目的基因的较简单方法是________;目的基因还可以从________文库获取,而从cDNA文库中不一定能得到,原因是______________________________。

(2)用限制酶处理质粒和目的基因后,用________酶处理,可形成基因表达载体,该载体的化学本质是________。

(3)转基因技术是否成功,需要对受体细胞进行分子水平的检测,首先是检测受体细胞________上是否插入了目的基因,这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。检测方法是采用________。最后还要检测目的基因是否翻译成了相应的蛋白质,利用的技术是________。

 

(1)人工合成法 基因组 cDNA是由生物发育的某个时期的mRNA逆转录产生的(其他合理答案也可) (2)DNA连接 DNA (3)染色体的DNA DNA分子杂交技术 抗原—抗体杂交技术 【解析】(1)若已知干扰素是氨基酸序列,则可以通过逆转录法获得目的基因;cDNA文库是部分基因文库,因为cDNA是由生物发育的某个时期的mRNA逆转录产生的,所以cDNA中不一定有目的基因,最好从基因组文库中获取。(2)用限制酶处理载体和目的基因后,将目的基因与载体连接,需要使用DNA连接酶处理,基因与载体的化学本质是相同的,都是DNA。(3)检测目的基因使用DNA分子杂交技术;检测蛋白质采用的是抗原—抗体杂交技术。  
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考点分析:
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如图是利用基因工程技术培育转基因植物,生产可食用疫苗的部分过程示意图,其中Pst  Ⅰ、Sma  Ⅰ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性内切酶。下列说法错误的是(    )。

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A.图示过程是基因工程的核心步骤

B.表达载体构建时需要用到限制酶Sma 

C.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来

D.除图示组成外,表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构

 

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右图为表达载体的模式图,若结构X是表达载体所必需的,则X最可能是(    )。

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A.氨苄青霉素抗性基因

B.启动子

C.限制酶

D.DNA连接酶

 

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限制性核酸内切酶EcoRⅠ对DNA的识别序列是5′GAATTC3′,当用它处理环状DNA分子时,可形成(    )。

A.两端相同的线性DNA,有黏性末端

B.两端相同的线性DNA,无黏性末端

C.两端不同的线性DNA,一端有黏性末端,一端无黏性末端

D.两种末端无法判断

 

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科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下面的问题。

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(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增,该技术须用________酶,所需的原料是________。

(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点(如下表):

限制酶

BamHⅠ

Hind 

EcoR 

Sma 

识别序列及

切割位点

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用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用Sma  Ⅰ酶切割,原因是

__________________________________________________________________

_________________________________________________________________。

图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用________酶对外源DNA、质粒进行切割。

(3)图中⑤、⑥依次表示组织培养过程中抗盐烟草细胞的________、________过程。

(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是___________________________________________________。

 

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在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。

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请据图回答下面的问题。

(1)A过程需要的酶有___________________________________________。

(2)B过程及其结果体现了质粒作为载体必须具备的两个条件是

________________________________________________________________。

(3)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入________。

(4)在D过程中,抗虫基因遗传信息的传递过程是_____________________。

(5)获取真核生物的基因常用的方法是______________,包括_____________。

(6)如果利用DNA分子杂交原理对再生植物进行检测,D过程应该用

_______________________________________________________作为探针。

(7)科学家在进行实验过程中,采用了两种方案:一是将抗虫基因导入离体的棉花叶片细胞进行植物组织培养;请你想另外一种方案:可以将抗虫基因导入植物的________中,再进行培养,导入成功的标志是

_______________________________________________________________。

 

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