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转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、Apa...

转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请据图回答下面的问题。

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(1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶________,对  ________进行切割。

(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有______________,作为标记基因。

(3)香蕉组织细胞具有________,因此,可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的________。

 

(1)PstⅠ、EcoRⅠ 含抗病基因的DNA、质粒 (2)抗卡那霉素基因 (3)全能性 脱分化、再分化 【解析】(1)由于限制酶Sma Ⅰ的切割位点在抗病基因的中间,因此不能用限制酶SmaⅠ来进行切割目的基因。要将目的基因从含抗病基因的DNA分子中切割下来,从图中看需要用限制酶Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ同时进行切割。而运载体要和目的基因含有相同的黏性末端才能进行连接,所以质粒也要用限制酶Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ进行切割。(2)由于卡那霉素能抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,所以构建的基因表达载体A中应含抗卡那霉素基因,作为标记基因。(3)由于香蕉组织细胞具有全能性,因此利用植物组织培养技术可将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。  
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