Question

2011年11月，武汉大学利用细菌将人的血清白蛋白基因导入水稻体内，借助水稻合成了人的血清白蛋白，这种蛋白质和人体自然产生的这类物质是完全一致的，这一成果轰动了生物界。结合图示回答转基因水稻培育过程的相关问题。

(1)限制酶Mun  Ⅰ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是—C^↓AATTG—和—G^↓AATTC—。为保证重组质粒表达载体的准确构建，应该怎样操作？______，________，________。

(2)②过程常用的细菌是________。

(3)③经历的生理过程主要有________和________两个阶段。培育出转基因水稻完整个体所依据的生物学原理是__________________________________。

(4)基因工程的最后步骤是目的基因的检测与鉴定，在此步骤可对培育的植株进行分子水平的检测，可检测的物质有______________、____________、______________。

Answer

(1)用限制酶Mun Ⅰ切割质粒 用限制酶EcoR Ⅰ切割含目的基因的DNA分子 用DNA连接酶连接目的基因和质粒

(2)农杆菌

(3)脱分化 再分化 植物细胞的全能性

(4)人血清白蛋白基因 人血清白蛋白基因转录出的mRNA 人血清白蛋白

【解析】(1)目的基因的两侧是限制酶EcoRⅠ的识别序列，因此需用限制酶EcoR Ⅰ切割含目的基因的DNA分子；但是若用限制酶EcoRⅠ切割质粒，会破坏标记基因，因此，需用限制酶Mun Ⅰ切割质粒；用这两种酶切出的黏性末端相同，因此可用DNA连接酶连接目的基因和质粒。(2)将表达载体导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，因此常用的细菌是农杆菌。(3)过程③是组织培养获得完整植株的过程，因此主要的过程是脱分化获得愈伤组织，经再分化获得胚状体。转基因植物的培育体现了植物细胞的全能性。(4)目的基因的检测与鉴定在分子水平上来看，应进行目的基因、转录出的mRNA和翻译出的蛋白质三种物质的检测。