肺细胞中的let7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let7基因导入肺癌细胞实现表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。
图1
图2
请回答有关问题。
(1)进行过程①时,需用________酶切开载体以插入let7基因。
(2)进行过程②时,需用______酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于传代培养。
(3)研究发现,let7基因能影响癌基因RAS的表达,其影响机理如图2。据图分析,可从细胞中提取______进行分子杂交,以直接检测let7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中______(RAS mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。
科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高,可以在相对寒冷的环境中生长。下图是转基因抗冻番茄的培育过程示意图。
(1)若图中Ⅱ是科学家构建的鱼抗冻蛋白基因的表达载体,则该基因表达载体的组成通常应包括____________________等。
(2)科学家常采用________法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用________技术检测目的基因是否插入番茄的基因组。
(3)多聚半乳糖醛酸酶(PG酶)可将成熟的番茄果实细胞壁中的多聚半乳糖醛酸降解为半乳糖醛酸,从而导致果实软化。抑制PG酶的活性可以延长番茄果实储藏期,请用文字描述采用蛋白质工程技术降低该酶活性的一般过程。
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_____________________________________________________
_________________________________________________________________。
下图表示从苏云金芽孢杆菌分离出来的杀虫晶体蛋白质基因(简称Bt基因)及形成转基因抗虫棉的图解。请据图回答下面的问题。
(1)图中a过程要用到的酶是_______________________________________。
(2)在进行图中b过程时,由我国科学家独创的十分简便经济的方法是________,此外,也经常采用________法。若要培育转基因绵羊,则此过程要用________的方法。
(3)为确定抗虫棉是否培育成功,既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交测试,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是_________________________________________________________________。
(4)活化的毒性物质应是一种________分子,可以全部或部分嵌合于昆虫的细胞膜上,使细胞膜产生孔道,导致细胞由于渗透平衡的破坏而破裂。
(5)我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉、抗虫水稻等研究,可以减少农药、杀虫剂的使用。这将对________起到重要作用。
下列技术依据DNA分子杂交原理的是( )。
①观察DNA在细胞中的分布 ②检测目的基因是否导入细胞 ③检测目的基因是否翻译 ④检测目的基因是否进行转录
A.②③ B.①③ C.②④ D.①④
现有一长度为1000碱基对(bp)的DNA分子,用限制性核酸内切酶EcoRⅠ单独酶切后得到的DNA分子仍是1000 bp,用Kpn Ⅰ单独酶切得到400 bp和600 bp两种长度的DNA分子,用EcoR Ⅰ、Kpn Ⅰ同时酶切后得到200 bp和600 bp两种长度的DNA分子,该DNA分子的酶切图谱(如图所示)正确的是( )。
在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是( )。
A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C.将重组DNA分子导入烟草原生质体
D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞