Question

家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可提取干扰素用于制药。

(1)进行转基因操作前，需用________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。

(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的________和________之间。

(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液(含Mg^2＋)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、________和________。

(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以____________________，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

Answer

(1)胰蛋白(或胶原蛋白)

(2)启动子 终止子

(3)对干扰素基因特异的DNA引物对 TaqDNA聚合酶

(4)扩大细胞贴壁生长的附着面积

【解析】(1)细胞培养的第一步就是用胰蛋白酶或胶原蛋白酶把动物组织分散成单个细胞。(2)从cDNA文库中获得目的基因没有启动子和终止子所以必须把目的基因插入到表达载体的启动子和终止子之间。(3)PCR技术的模板是DNA，原料是4种脱氧核糖核苷酸，条件是相应的引物和耐高温DNA聚合酶。(4)将多孔的中空的薄壁小玻璃球放入反应器，其目的一是扩大细胞贴壁生长的附着面积、增大培养细胞的数目；二是为细胞生长提供氧气。