Question

酵母菌生长的最适宜温度在20～30 ℃之间，能在pH值为3～7.5的范围内生长，在氧气充足的环境中主要以出芽生殖的方式快速增殖。大约每1.5～2 h增殖一代。某研究性学习小组据此探究酵母菌种群在不同的培养液浓度和温度条件下种群密度的动态变化，进行了如下实验，实验操作步骤如下：

第一步：配制无菌马铃薯葡萄糖培养液和活化酵母菌液。

第二步：利用相同多套装置，按下表步骤操作。

装置编号	A	B	C	D
装置容器内的溶液	无菌马铃薯葡萄糖培养液/mL	10	10	5	5
无菌水/mL	－	－	5	5
活化酵母菌液/mL	0.1	0.1	0.1	0.1
温度/℃	5	25	5	25

第三步：用血球计数板计数装置中起始酵母菌数目，做好记录。

第四步：将各装置放在其他条件相同且适宜的条件下培养。

第五步：连续7 d，每天随机抽时间取样计数，做好记录。

回答下列问题。

(1)改正实验操作步骤中的一处错误___________________________。

(2)某同学第5 d在使用血球计数板计数时做法如下：

①振荡摇匀试管，取1 mL培养液并适当稀释(稀释样液的无菌水中加入了几滴台盼蓝染液)。

②先将________________放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘，让培养液自行渗入，多余培养液________________，制作好临时装片。

③显微镜下观察计数：在观察计数时只记________(被、不被)染成蓝色的酵母菌。

Answer

(1)第五步中应每天同一时间(定时)取样(2)②盖玻片 用滤纸(吸水纸)吸去 ③不被

【解析】(1)实验中要注意遵循单一变量和对照原则，该实验中要注意在每天同一时间取样，否则由于时间不同而影响结果准确性。

(2)计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格；另一种是一个大方格分成25个中方格；而每个中方格又分成16个小方格。但无论是哪种规格的计数板，每一个大方格中的小方格数都是相同的，即16×25＝400个小方格。每一个大方格边长为1 mm，则每一大方格的面积为1 mm2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0.1 mm，所以计数室的容积为0.1 mm3。在计数时，通常数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均值，再乘上16或25，就得一个大方格中的总菌数，然后再换算成1 mL菌液中的总菌数。