Question

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？            ，为什么？                           。

（2）③④⑤过程是          技术，通过该过程可在体外获得大量目的基因，需要用到          酶。若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行4次，至少需要提供胸腺嘧

啶                                个。

（3）图中B是         ，在利用AB获得C的过程是基因工程的核心，一般的方法是用          切割A和B，使它们产生               ，再加入             ，才可形成C。最终形成的C应该含有的基本元件是                                            等。

（4）为使过程⑧更易进行，可用              （药剂）处理D。由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率低，所以在转化后通常需要进行              操作。

Answer

（1）不能；皮肤细胞中的胰岛素基因未表达（或未转录），不能形成胰岛素mRNA

（2）PCR；热稳定（耐高温）的DNA聚合；15（a-b）

（3）质粒；同一种限制酶；相同的黏性末端；DNA连接酶；目的基因、启动子、终止子、标记基因

（4）CaCl2；筛选

【解析】

试题分析：

（1）据图分析观察，要得到知道合成胰岛素的相应mRNA只有在能分泌胰岛素的胰岛B细胞中才能得到，其他细胞中该基因不表达，无法得到

（2）据图分析观察③④⑤过程是PCR技术；PCR扩增该过程中的DNA复制，需要用到耐高温的热稳定性DNA聚合酶；③④⑤过程连续进行4次即DNA复制了四次得到DNA数为24=16，相当于完全复制了DNA16-1=15个，又G=C=b,则A=T=(2a-2b)/2=a-b，故复制四次，至少需要提供胸腺嘧啶为15（a-b）

（3）据图分析知从大肠杆菌中提取的双链环状结构为质粒；构建基因表达载体的过程中要用同一种限制酶切割载体和含有目的基因的DNA片段得到相同的黏性末端，再用DNA连接酶将两者连接起来，形成重组质粒；构建好的表达载体应该含有目的基因、启动子、终止子，这样目的基因才可能被表达，含有标记基因才能检测是否目的基因已经导入受体细胞

（4）目的基因导入原核细胞常用CaCl2溶液处理，则更易于导入，导入后因成功的频率低，所以要进行筛选检测来保证。

考点：本题考查基因工程的内容，意在考查考生对所学知识的理解和掌握并分析图解的能力。