Question

日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

(1)绿色荧光蛋白基因在该实验中是作为________基因。图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因和质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后形成的黏性末端：______________。

(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是______________________________________________________________。

(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_________________________________________。

(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是(用数字表示)________________。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列

③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)

④表达出蓝色荧光蛋白

Answer

(1)目的

(2)显微注射技术 (3)为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因 (4)②①③④

【解析】

试题分析：（1）从题目中可看出，绿色荧光蛋白基因作为该实验中的目的基因，质粒被限制酶切割后形成的黏性末端为（2）过程三将重组质粒导入动物细胞中，一般采用的技术是显微注射法；（3）标记基因的作用是，为了鉴定受体细胞是否含有目的基因；（4）蛋白质工程技术的操作顺序为②①③④。

考点：本题考查基因工程及其应用的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能够识图和获取图像信息的能力。