Question

下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。

据图回答：

(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上培养，然后再在含________的培养基上进行。

(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________(填字母代号)。

A．启动子　　　　　　　　　B．tetR

C．复制原点              D．ampR

(3)过程①可采用的操作方法是________(填字母代号)。

A．农杆菌转化      B．大肠杆菌转化

C．显微注射      D．细胞融合

(4)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的________性。

(5)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用________(填字母代号)技术。

A．核酸分子杂交      B．基因序列分析

C．抗原—抗体杂交      D．PCR

Answer

(1)HindⅢ和BamHⅠ 氨苄青霉素 四环素

(2)A (3)C (4)

(5)全能 (6)C

【解析】

试题分析：

（1）由图可知目的基因和质粒上都有BamHI和HindIII酶切位点，因此应用它们切割，切割后需要将目的基因和运载体用DNA连接酶进行连接；因为该质粒上有抗氨苄青霉素的抗性标记基因，四环素抗性基因被破坏，因此应先放在含氨苄青霉素的培养基中进行培养，然后放在含有四环素的培养基上培养，以便筛选。

（2）基因的表达主要是转录和翻译，启动子是驱动基因进行转录的，故应是A。

（3）农杆菌转化法是将重组载体导入到植物中常用的方法，故A错误；大肠杆菌转化法是导入到微生物细胞常用的方法，故B错误；因为是要导入到动物细胞中，故最常用显微注射法，故C正确；细胞融合技术不能把外源基因导入受体细胞中。

（4）早期胚胎分割后能得到多个基因型相同的个体，利用了细胞的全能性。

（5）检测蛋白是否表达，也就是检测目的基因表达产物蛋白质，可以用抗原抗体杂交的方法，故C正确。

考点：本题考查基因工程的有关知识，意在考查考生识图能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。