Question

基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据下图示判断下列操作正确的是（    ）

A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

Answer

D

【解析】

试题分析：由题意“限制酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶II的识别序列和切点是-↓GATC-”可知，限制酶I的识别序列中包含了限制酶II的识别序列和切点，所以能被限制酶I识别并切割的序列也可以被限制酶II识别并切割。目的基因两端分别是限制酶I的识别序列和切点和限制酶II的识别序列和切点，只有用限制酶II才能将目的基因切割下来；质粒有GeneI和GeneⅡ表示两种标记基因，分别有限制酶II的识别序列和限制酶I的识别序列，如果用限制酶II切割，则GeneI 和GeneⅡ都被破坏，造成重组质粒无标记基因，用限制酶I切割，则破坏GeneⅡ，保留GeneI，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以连接形成重组DNA；目的基因和质粒虽然用了两种不同的限制酶，但是切割出来的黏性末端是一样的。D项正确。

考点：本题考查基因工程限制酶相关知识，意在考查考生能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容的能力。