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人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊...

人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:

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(1)htPA基因与载体用_________切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体。该重组表达载体还必须具有               的启动子、终止子以及标记基因等。

(2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射______        ____。采集的精子需要经过_____      ___,才具备受精能力。

(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用_________技术。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行__________。移植后的胚胎能在代孕母羊子宫中存活的生理基础是                               利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的__________。

(4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到________         ,说明目的基因成功表达。

 

(1)同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶)(“同种”没写不给分); 乳腺蛋白基因 (2)促性腺激素; 获能(处理) (3)显微注射法; DNA分子杂交(或核酸探针) ; 性别鉴定; 受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应 ; 全能性 (4)htPA(或人组织纤溶酶原激活物) 【解析】 试题分析: (1)在基因工程中,构建基因表达载体时,把目的基因与运载体一般用同种限制酶进行切割,再用DNA连接酶连接,以构建基因表达载体;乳腺生物反应器需要把药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起。 (2)超数排卵处理时,需要注射促性腺激素;采集的精子必须经过获能处理后才具备受精能力。 (3)将重组DNA分子导入动物细胞的方法是显微注射法;检测目的基因是否已经插入受体细胞的DNA,可采用DNA分子杂交技术;为了获得母羊,胚胎移植前需要对胚胎进行性别鉴定;移植后的胚胎能在受体母羊的子宫内存活的生理学基础是受体子宫对外来胚胎不发生免疫排斥反应;利用胚胎分割和胚胎移植技术可以获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的全能性。 (4)目的基因基因成功表达的标志是htPA基因(目的基因)在母羊的羊乳细胞中转录翻译出相应的蛋白质(人组织纤溶酶原激活物) 考点:本题考查基因工程的有关知识,意在考查考生识图能力和理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。  
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考点分析:
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研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段。

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(1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中___________(填“低表达”或“高表达”)。H蛋白是一个跨膜蛋白,结构如右图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建___________区基因,转入原核细胞表达并提纯。

(2)将H蛋白注射到小鼠体内,取该小鼠的脾脏细胞与___________细胞进行融合,使用的化学诱导剂是______________,细胞融合的原理是_________________。

(3)将融合细胞在__________培养基中培养,一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,吸取有克隆生长的细胞培养孔中的________(填“上清液”或“沉淀细胞”),应用____________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选,就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。

(4)将筛选得到的杂交瘤细胞,经过_____________或小鼠腹腔内培养,获取大量的单克隆抗体。

(5)治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”,杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体______________的特点。

 

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口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病,目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VPI。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗,过程如下图1所示。图2表示目的基因与pZHZ1质粒构建重组质粒的过程,E、F、G、H分别为A、B、C、D四种不同限制酶的酶切位点。请据图回答。

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(1)口蹄疫病毒的遗传物质为RNA,要获得VPI基因可通过               方法获得。

(2)如图2所示,若限制酶A、B切割出的黏性末端完全不同,那么用这种双酶切的方法构建重组质粒的优点是                             

(3)已知质粒pZHZ1的长度为3.7kb,(1kb=1000对碱基)其中EF区域长度为0.2kb,GE区域长度为0.8kb,FH区域长度为0.5kb。现分别用限制酶C、D切割重组质粒pZHZ2样品,结果被酶C切割成1.6kb和3.1kb两个片段,被酶D切割成1.2kb和3.5kb两个片段。据酶切结果判断VPI基因大小为       kb,并将目的基因内部的酶C、酶D切割位点用相应的字母标注在下图对应位置。

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(每小格代表0.1kb)

(4)过程③为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒,可用___________处理土壤农杆菌,使其处于感受态

(5)过程的培养基中除了加入各种必需营养物质和定浓度植物激素外,还需要添加          筛选出含有重组质粒的叶片小段。

(6)用PCR方法检测转基因番茄是否含有目的基因时,需根据________________的核苷酸序列设计特异引物,若其中一种引物共用了31个,则目的基因的番茄DNA最多扩增了__ __次。

 

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I.(6分)2009年6月,国家食品药品监督管理局通告了“东方牌”系列奶粉为不合格产品.该系列奶粉是用80%的麦芽糊精和20%的奶粉简单勾兑而成,蛋白质含量低,婴儿常吃此奶粉会影响其正常生长发育及健康。请据以上资料,回答下列问题。

I.(1)劣质奶粉中含有大量还原糖,如果用斐林试剂鉴定,则该试剂与待测样液在试管中混合均匀后,还必须经过________处理,预计试管中混合液的颜色变化是_________________。

(2)如果要鉴定劣质奶粉中是否含有蛋白质,应选用的试剂是________。目前检测技术中,单纯检测奶粉中________元素的含量无法确定蛋白质含量是否达标。因为在奶粉中添加三聚氰胺可以在食品检测时提高这一元素的测定值,以次充好,危害消费者

(3)奶粉中都添加钙、铁等元素其中碳酸钙是人体骨骼和牙齿中的重要组成部分,铁是血红蛋白的组成成分,这说明无机盐的生理作用是_____            ___________。

(4)奶粉营养价值高低的主要标准是看必需氨基酸的种类和含量,如赖氨酸是人体必需氨基酸,只能从          中获得。

II.某生物兴趣小组为了探究赖氨酸是否也是大鼠的必需氨基酸?设计如下实验方案,请补充并加于完善:

1实验目的和原理: 略

2实验材料和用具:20只生长发育状况相同的正常幼年大鼠、分装在不同试剂瓶中的20种氨基酸、不含蛋白质和氨基酸的食物、秤、天平等。

3实验方法和步骤

配食:取一定量的不含蛋白质和氨基酸的食物,加入含量和比例适宜的_____________,配制成食物A(对照组);另取等量的不含蛋白质和氨基酸的食物,加入_________________,其含量和比例与食物A中相同配制成食物B。

分组:将20只幼年大鼠平均分成甲、乙两组,分别称量其体重。

饲喂:甲组每天饲喂适量的食物A;乙组每天饲喂______________________两组大鼠其他饲养条件相同。

观测:分别测量甲、乙两组大鼠的体重,并计算体重增加量

4实验结果预测及结论:

实验结果(营养状况和体重)

实验结论

两组大鼠营养状况和体重基本相同

赖氨酸不是大鼠的必需氨基酸

甲组大鼠          ,乙组大鼠                  

赖氨酸是大鼠的必需氨基酸

 

 

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生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点,下列叙述错误的是(    )

A.应严格选择转基因植物的目的基因,避免产生对人类有害的物质

B.当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验,但不反对治疗性克隆

C.反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿

D.生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力

 

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下图是利用胚胎工程技术培育优质奶牛的主要步骤下列叙述正确的是(    )

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AA所表示的细胞不一定是受精卵细胞

B①②两个胚胎具有不同遗传物质

C图中a过程包括卵裂、囊胚和原肠胚等阶段

D应把移植到处于发情状态的母牛的输卵管中

 

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