Question

人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

（1）htPA基因与载体用_________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。该重组表达载体还必须具有               的启动子、终止子以及标记基因等。

（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射______        ____。采集的精子需要经过_____      ___，才具备受精能力。

（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_________技术。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行__________。移植后的胚胎能在代孕母羊子宫中存活的生理基础是                               。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的__________。

（4）若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到________         ，说明目的基因成功表达。

Answer

（1）同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）（“同种”没写不给分）； 乳腺蛋白基因

（2）促性腺激素； 获能（处理）

（3）显微注射法； DNA分子杂交（或核酸探针） ； 性别鉴定； 受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应 ； 全能性

（4）htPA（或人组织纤溶酶原激活物）

【解析】

试题分析：

（1）在基因工程中，构建基因表达载体时，把目的基因与运载体一般用同种限制酶进行切割，再用DNA连接酶连接，以构建基因表达载体；乳腺生物反应器需要把药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起。

（2）超数排卵处理时，需要注射促性腺激素；采集的精子必须经过获能处理后才具备受精能力。

（3）将重组DNA分子导入动物细胞的方法是显微注射法；检测目的基因是否已经插入受体细胞的DNA，可采用DNA分子杂交技术；为了获得母羊，胚胎移植前需要对胚胎进行性别鉴定；移植后的胚胎能在受体母羊的子宫内存活的生理学基础是受体子宫对外来胚胎不发生免疫排斥反应；利用胚胎分割和胚胎移植技术可以获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的全能性。

（4）目的基因基因成功表达的标志是htPA基因（目的基因）在母羊的羊乳细胞中转录翻译出相应的蛋白质（人组织纤溶酶原激活物）

考点：本题考查基因工程的有关知识，意在考查考生识图能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。