有关生物实验的叙述,合理的是
A.观察线粒体时,利用健那绿染液可将线粒体染成蓝绿色
B.探究温度对酶活性的影响时,可选择过氧化氢溶液作为反应的底物
C.胡萝卜可作为检测生物组织中还原糖的实验材料
D.探究生长素类似物促进植物插条生根的最适浓度时,不需要进行预实验
右图曲线表示不同pH对三种蛋白酶活力的影响, 有关叙述错误的是
A. 酶活力可用单位时间内产物增加的量来表示
B. 乙酶的活力不受pH影响
C. pH由 6降至 2, 甲酶的活力不变
D. 与乙酶相比, 甲酶和丙酶的适宜pH范围较窄
有关细胞的叙述,正确的是
A.细胞代谢增强时,自由水与结合水的比值降低
B.同一个体的不同细胞内核酸的种类和数量都相同
C.细胞生物膜系统有利于细胞有序完成各项生理功能
D.能进行有氧呼吸的细胞一定有线粒体
人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:
(1)htPA基因与载体用_________切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体。该重组表达载体还必须具有 的启动子、终止子以及标记基因等。
(2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射______ ____。采集的精子需要经过_____ ___,才具备受精能力。
(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用_________技术。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行__________。移植后的胚胎能在代孕母羊子宫中存活的生理基础是 。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的__________。
(4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到________ ,说明目的基因成功表达。
研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段。
(1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中___________(填“低表达”或“高表达”)。H蛋白是一个跨膜蛋白,结构如右图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建___________区基因,转入原核细胞表达并提纯。
(2)将H蛋白注射到小鼠体内,取该小鼠的脾脏细胞与___________细胞进行融合,使用的化学诱导剂是______________,细胞融合的原理是_________________。
(3)将融合细胞在__________培养基中培养,一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,吸取有克隆生长的细胞培养孔中的________(填“上清液”或“沉淀细胞”),应用____________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选,就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。
(4)将筛选得到的杂交瘤细胞,经过_____________或小鼠腹腔内培养,获取大量的单克隆抗体。
(5)治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”,杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体______________的特点。
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病,目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VPI。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗,过程如下图1所示。图2表示目的基因与pZHZ1质粒构建重组质粒的过程,E、F、G、H分别为A、B、C、D四种不同限制酶的酶切位点。请据图回答。
(1)口蹄疫病毒的遗传物质为RNA,要获得VPI基因可通过 方法获得。
(2)如图2所示,若限制酶A、B切割出的黏性末端完全不同,那么用这种双酶切的方法构建重组质粒的优点是 。
(3)已知质粒pZHZ1的长度为3.7kb,(1kb=1000对碱基)其中EF区域长度为0.2kb,GE区域长度为0.8kb,FH区域长度为0.5kb。现分别用限制酶C、D切割重组质粒pZHZ2样品,结果被酶C切割成1.6kb和3.1kb两个片段,被酶D切割成1.2kb和3.5kb两个片段。据酶切结果判断VPI基因大小为 kb,并将目的基因内部的酶C、酶D切割位点用相应的字母标注在下图对应位置。
(每小格代表0.1kb)
(4)过程③为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒,可用___________处理土壤农杆菌,使其处于感受态。
(5)过程⑥的培养基中除了加入各种必需营养物质和一定浓度的植物激素外,还需要添加 筛选出含有重组质粒的叶片小段。
(6)用PCR方法检测转基因番茄是否含有目的基因时,需根据________________的核苷酸序列设计特异引物,若其中一种引物共用了31个,则含目的基因的番茄DNA最多扩增了__ __次。