Question

（8分）因为猪的基因和人类的基因存在一定相似度。据报道经过特殊处理的猪皮可在人身上存活3周左右，起到保护创面免受感染的作用。为了使移植的猪皮存活时间更长，有人设法导入人的相关基因(用P表示)，获得转基因小白猪。其简单流程如图所示：

(1)过程①中形成重组DNA常用的酶有____；将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是_____。

(2)过程②中，常用________酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养成纤维细胞时需要满足的条件是无菌、无毒的环境、________、温度和pH、________。

(3)过程③中所用的胚胎工程技术是______________，然后将早期胚胎移入另一头与供体__________但未经配种的代孕母猪的相应部位。

(4)图中的卵母细胞应在体外培养到__________期。

Answer

(8分)（1）限制性核酸内切酶、DNA连接酶 显微注射法

（2）胰蛋白（或胶原蛋白） 营养 气体环境

（3）早期胚胎培养 同期发情 （4）减数第二次分裂中

【解析】

试题分析：（1）构成重组DNA，会用到限制性核酸内切酶对目的基因和载体进行切割，然后用DNA连接酶连接。将目的基因导入动物细胞常用显微注射法。

（2）要将动物细胞分散开应用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，动物细胞培养应在无菌、无毒的环境、需要提供营养物质，适宜的温度和pH，还需要在气体环境中，一般是在95%的空气和5%的二氧化碳。

（3）由重组细胞到早期胚胎需要用到早期胚胎培养技术，然后移植到经过同期发情的受体内。

（4）卵母细胞应在体外培养到减数第二次分裂中期作为受体细胞。

考点：本题考查基因工程和胚胎工程相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。