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某中学杨老师自制大蒜提取液,希望这种简便、经济的提取液能够高效地杀灭餐具上的细菌...

某中学杨老师自制大蒜提取液,希望这种简便、经济的提取液能够高效地杀灭餐具上的细菌,杨老师完成了下面的探究实验:

(1)制作提取液:杨老师将大蒜榨汁后制成提取液,具体做法如下表所示。请根据表中数据,在表中的括号内填出1#提取液应加入的冷开水量:

大蒜提取液编号

1#

2#

大蒜(g)

350

350

冷开水(mL)

(  )

880

无色食醋(mL)

/

20

制备量

1 000 mL

1 000 mL

(2)使用方法:将餐具浸泡在提取液中10 min后取出冲洗。

(3)样品抽取:将经过    处理的滤纸贴在餐具表面1 min,然后将滤纸放到50 mL无菌水中,充分振荡后制成原液。再取1 mL原液加入    mL无菌水中摇匀制成10倍稀释液。

(4)分离及培养:用    法分离细菌。分别取1 mL原液和10倍稀释液,分别加到伊红-美蓝培养基中,用灭菌、消毒后的    (用具),将原液和10倍稀释液均匀涂布到整个平板上。每个浓度各做三个培养皿,其目的是   

本实验另设1 mL无菌水涂布在未接种的培养皿上为空白对照,原因是排除                       

最后在37 ℃下培养48 h。

(5)观察记录:设计1#提取液实验组的观察记录表。

(6)结果分析:统计数据,得到消毒前后的菌落总数变化(单位:cfu/cm2,每平方厘米样品中含有的细菌群落总数)

编号

条件

总份数

<1

1~10

10~102

102~103

103~104

>104

1#

取液

消毒前

30

0

0

0

3

18

9

消毒后

30

14

12

4

0

0

0

2#

取液

消毒前

33

2

0

0

3

12

16

消毒后

33

19

10

4

0

0

0

根据消毒前后的数据可知:                                                                 

2#提取液效果高于1#,分析可能的原因:                                                      

请你给老师提出需要进一步研究的问题:                                                   

 

(1)900 (3)灭菌 9 (4)涂布分离(稀释涂布平板)(只写“涂布”不可) 玻璃刮刀(三角刮刀、涂布器) 重复实验,减小实验误差 灭菌不彻底对本实验的影响 (5) 提取液 菌落数 1号培养皿 2号培养皿 3号培养皿 平均值 原液         10倍稀 释液         (6)大蒜提取液能够高效杀菌 无色食醋促使大蒜提取液呈微酸性,协同杀菌 如:①进一步探究同等条件下,醋和大蒜汁哪种消毒作用更好?②不同浓度的大蒜汁,哪种消毒效果更好?③醋作用的最适pH?(任选其中一种即可,其他合理答案也可) 【解析】设计实验要遵循单一变量原则、对照性原则和平行重复原则,在制作提取液时,为了遵循单一变量原则,对照实验1#和2#液体量必须相同,使其唯一的变量是有无无色食醋。本实验探究的是大蒜提取液的杀菌效果,要防止杂菌干扰实验结果,所以每一步都要严格进行无菌操作,为了使结果更可靠,统计更准确,原液和10倍稀释液都要多设置几组培养皿进行涂布培养,求其平均值,以增加实验数据的可靠性。通过统计消毒前后的菌落总数变化数据看,无论1#提取液还是2#提取液,都是消毒后的样品含菌数量明显减少,说明大蒜提取液是能够高效杀菌的。并且2#提取液杀菌效果比1#提取液更好。  
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考点分析:
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常见的酿酒酵母菌只能利用葡萄糖而不能利用木糖,自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精但对酒精的耐受能力较差。下面是利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母菌的培育过程,请分析回答下列问题:

(1)将自然界中采集到的葡萄带回实验室,用    将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,瓶中的液体经适当稀释后,用      法接种于固体培养基上,在适宜的条件下培养,获得各种菌落。

(2)将培养基上的酵母菌菌株转接到以木糖为唯一碳源的培养基中,无氧条件下培养一周后,有些酵母菌死亡,说明这些酵母菌             。从存活的酵母菌提取DNA,并用PCR技术大量扩增目的基因。

(3)将目的基因连接到一种穿梭质粒(可以在大肠杆菌中复制和在酿酒酵母菌中表达的质粒)上。该质粒具有两种标记基因,即氨苄青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。大肠杆菌被该质粒转化后,应接种于含    的培养基上进行筛选。将质粒导入酵母菌时,由于氨苄青霉素不能抑制酵母菌繁殖,应选择缺乏    能力的酿酒酵母菌作为受体菌。从细胞结构看,酵母菌不同于大肠杆菌的主要特点是                 

(4)对转基因酿酒酵母菌发酵能力进行测试,结果如下图所示。

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据图分析,将转基因酿酒酵母菌接种在    为碳源的培养基中进行发酵能力测试,最初培养基中的    糖被快速消耗,随着发酵继续进行,转基因酿酒酵母菌能够                  ,说明所需菌株培育成功。

 

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二口恶英是持久性有机污染物,其毒性强,降解难。某种白腐真菌能利用二口恶英中的碳元素作为碳源。为了降解废水中的二口恶英,研究人员从土壤中筛选获得了能降解利用二口恶英的白腐真菌菌株,筛选的主要步骤如图所示,①为土壤样品,⑧为筛选出的目的菌株。请回答下列问题:

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(1)⑤中培养目的菌株的选择培养基中应加入    作为唯一碳源,如果要测定②中活菌数量,常采用    法。

(2)④、⑥为对照组,⑤为实验组,④、⑥中加入马铃薯琼脂培养基(培养真菌的培养基)。若⑥在培养过程中没有菌落生长,说明培养基没有    ;若④中的菌落数目明显    (填“多于”或“少于”)⑤,说明⑤已经筛选出一些菌落。

(3)在提取白腐真菌细胞内的分解酶时,通常先将菌株细胞        制取粗酶液,再进一步获得相应的酶;从中分离提取的酶通常需要检测    ,以确定其应用价值;为降低生产成本,可利用    技术使白腐真菌重复利用。

(4)提取白腐真菌细胞内的蛋白质过程中,为了保证蛋白质不变性,需要对样品进行洗脱,措施一般是需要加入    ;在装填凝胶柱时,如果有    存在,会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。该真菌可以产生某种挥发性强、易溶于有机溶剂的芳香化合物,适于采用法提取。

 

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不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述不正确的是(  )

A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素

B.碳源物质也是该微生物的能源物质

C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质

D.水是该微生物的营养要素之一

 

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下列有关微生物的培养或纯化的叙述,错误的是(  )

A.微生物在培养前要先对培养基进行灭菌处理再接种

B.培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径

C.分离自养型微生物的方法是用纤维素作为唯一碳源的培养基

D.分离纯化微生物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法

 

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有人通过实验探究某海藻的最佳培养条件,以获得最大生物量(注:生物量指单位体积的藻体干重)。

(1)在有光条件下培养海藻时,培养液中必须含有        ,还需定时向培养液中通入空气,目的是提供    。海藻光合速率随着不同光照强度的变化曲线如下图,图中B点表示最佳的培养条件。

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(2)该海藻在无光条件下仍能生长,但需在培养液中添加葡萄糖等有机物,目的是提供   

(3)向培养液中添加葡萄糖配成不同浓度的培养液,在一定光照条件下培养该海藻,测定海藻的生物量如下表:

葡萄糖

浓度(g/L)

0

0.1

0.2

0.4

0.6

1.0

海藻生

物量(g/L)

0.84

0.93

1.00

1.03

0.79

0.67

要确定培养海藻的最佳葡萄糖浓度,还需设计           的实验。

(4)综合上述实验,获得该海藻最大生物量的培养条件是                                    

 

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